CryⅠAC基因的克隆及转化结球甘蓝的研究的任务书任务书1.背景转基因技术是指把其它生物体中的基因导入到目标生物体中，使目标生物体得到新的基因，以达到改良或增强目标生物体性状的目的。转基因技术被广泛应用于农业、医学、工业等领域。CryⅠAC基因是获得广泛应用的一种转基因技术，它来源于一种名为Bacillusthuringiensis的细菌，能够产生一种名为CryⅠAC的蛋白，对靶害虫具有高度杀伤作用。因此，利用CryⅠAC基因在作物中实现杀虫防治已经成为极为重要的手段。结球甘蓝是我国重要的蔬菜作物之一，其在生长过程中常受害于多种昆虫害虫，如白菜蛾、菜青虫、甜菜夜蛾等，这些虫害严重影响其产量和质量。结球甘蓝的杀虫防治一直是蔬菜生产中的难点问题，因此利用转基因技术在结球甘蓝中引进CryⅠAC基因，对其进行杀虫防治是一种可行的办法。2.研究目标本研究的目标是克隆CryⅠAC基因，构建转化结球甘蓝的质粒，并进行转化，验证CryⅠAC基因在结球甘蓝中的杀虫效果，为结球甘蓝的杀虫防治提供一种新的途径。3.研究内容1)克隆CryⅠAC基因：采用反转录PCR技术，从Bacillusthuringiensis中克隆CryⅠAC基因，通过限制性内切酶切割和PCR扩增，得到高纯度的CryⅠAC基因片段。2)构建CryⅠAC基因转化结球甘蓝的质粒：将CryⅠAC基因子克隆到质粒表达载体中，构建CryⅠAC基因转化结球甘蓝的质粒，含有叶绿素合成酶基因、CryⅠAC基因和kanamycin抗性基因。3)结球甘蓝的转化：将CryⅠAC基因转化结球甘蓝的质粒经过农杆菌介导的方法，转化到结球甘蓝种子中，经过筛选和鉴定，得到转化植株。4)验证CryⅠAC基因在结球甘蓝中的杀虫效果：对CryⅠAC基因转化结球甘蓝和野生型结球甘蓝进行害虫试验，验证CryⅠAC基因在结球甘蓝中的杀虫效果。4.研究意义（1）对CryⅠAC基因转化结球甘蓝的基础研究:为深入研究CryⅠAC基因转化结球甘蓝的分子机制提供重要的实验基础。（2）理论意义:通过实践验证，为植物基因工程、生物技术的发展积累经验和理论依据。（3）应用价值:CryⅠAC基因转化结球甘蓝将有助于推进结球甘蓝科技升级，推广转基因抗虫技术在安全高效农业生产中的应用，为人类提高蔬菜品质，改善人类的生活质量做出积极贡献。5.研究方案研究步骤：第一步：利用PCR技术扩增CryⅠAC基因片段。第二步：将CryⅠAC基因子克隆到适当的质粒表达载体中。第三步：利用农杆菌介导的方法，将CryⅠAC基因转化到结球甘蓝种子中。第四步：对CryⅠAC基因转化结球甘蓝和野生型结球甘蓝进行害虫试验，验证CryⅠAC基因在结球甘蓝中的杀虫效果。研究时间：一年6.总体要求（1）按照任务书的研究目标和内容，开展工作，达到预期的研究结果和要求。（2）严格按照研究方案规定的技术路线来开展工作，保证研究质量和可靠性。（3）保证研究过程中的安全，不得使用任何有害化学物质。（4）严格遵守科研诚信规范，保证研究的真实性和可靠性，不得有造假行为。（5）及时汇报研究进展和研究结果，如有难点、问题和困难，及时向上级报告并寻求解决方案。7.资金预算根据研究所需的试剂、设备、耗材和人员经费等，预算总经费为20万元。其中，试剂耗材费用为5万元，设备购置费用为5万元，租赁实验场地费用为2万元，人员经费为8万元。8.结论通过本研究，可以验证CryⅠAC基因转化结球甘蓝的效果和杀虫效果，为利用转基因技术开展农业生产提供了新的思路和方法。同时，也可以丰富和完善CryⅠAC基因在不同农作物中的应用价值。