第二章 发酵液预处理1.ppt
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第二章发酵液预处理基本要求:了解发酵液的特性和固液分离工程及设备,掌握发酵液相对纯化的方法。重点:降低液体粘度的方法;凝聚与絮凝;发酵液中高价无机离子的除去;杂蛋白的除去。预处理的目的:分离除去菌体和其他悬浮颗粒,同时除去一部分可溶性杂质,改变滤液的性质,为提取和精制等后道工序创造有利条件。胞外产物,预处理时应尽可能使产物转移到液相,然后用固液分离除去固相。胞内产物,则应先收集菌体或细胞,经细胞破碎后,使产物转移到液相,再用固液分离除去细胞碎片。第一节发酵液过滤特性的改变1、发酵液的特性A、发酵产物浓度较低,大多为1%~10%,大部分为水。B、悬浮物颗粒小,相对密度与液相相差不大。C、固体粒子可压缩性大。D、液相粘度大,大多为非牛顿型流体。E、性质不稳定,随时间变化。(空气氧化、微生物污染、蛋白酶水解)2、改善发酵液过滤特性的方法有:调酸(等电点)、热处理、电解质处理、添加絮凝剂、添加表面活性剂、添加反应剂、冷冻-解冻、添加助滤剂等。一、降低液体粘度根据流体力学原理,滤液通过滤饼的速率与液体的粘度成反比,因此,降低液体的粘度可有效提高过滤速度。降低液体粘度常用的方法:加水稀释和加热。加水一倍,粘度下降50%以上才有效。升高温度可有效降低液体粘度,提高过滤速率;同时,使蛋白质凝聚,形成较大的凝聚体,进一步改善发酵液的过滤特性。需控制加热温度和时间。二、调整pHpH直接影响发酵液中某些物质的电解质和电荷性质,适当调节pH值可改善其过滤特性。(常用方法)大多数蛋白质的等电点在酸性范围内(pH4.0-5.5),利用酸性来调节发酵液pH使之达到等电点,可除去蛋白质等酸性两性物质。三、凝聚与絮凝采用凝聚和絮凝技术能有效改变细胞、细胞碎片及溶解大分子物质的分散状态,使其聚结成较大的颗粒,以提高过滤速率;同时,还能有效地除去杂蛋白质和固体杂质,提高滤液质量。工业最常用方法之一。凝聚是指在电解质作用下,由于胶体粒子之间双电层电排斥作用降低,电位下降,而使胶体体系不稳定的现象。絮凝是指在某些高分子絮凝剂存在下,基于桥架作用,使胶粒形成较大絮凝团的过程。1、凝聚凝聚作用是向胶体悬浮液中加入某种电解质,在电解质的异电离子作用下,胶粒的双电层电位降低,使胶体体系不稳定,胶体粒子间因相互碰撞而产生凝聚的现象。凝聚值:使胶体粒子发生凝聚的最低电解质浓度(mmol/L),表示电解质的凝聚能力。反离子的价数越高,凝聚值就越小,即凝聚能力越强。阳离子对带负电荷的发酵液胶体粒子凝聚力的次序:常用的凝聚电解质有:硫酸铝(明矾)Al2(SO2)3.18H20;氯化铝AlCl3.6H20;三氯化铁FeCl3.6H20;硫酸亚铁FeSO4.7H20;石灰;ZnSO4;MgCO3等。2、絮凝絮凝:絮凝是指在某些高分子絮凝剂存在下,基于桥架作用,使胶体粒子形成较大絮凝团的过程。絮凝作用是一个高分子聚合物(絮凝剂)的许多链节分别吸附在不同的胶粒表面上,产生桥架联接时,形成了较大的絮团。絮凝剂是一种能溶于水的高分子聚合物,其相对分子量可达数万至一千万,具有长链状结构,其链节上含有许多活性官能团。通过静电引力、范德华力或氢键的作用,强烈地吸附在胶粒的表面。絮凝剂的结构要求:一方面要求其分子必须含有较多的活性官能团,使之能和胶体粒子结合;另一方面要求有长链的线性结构,以便同时和多个胶体粒子结合。絮凝剂的分类:(1)有机高分子聚合物:聚丙烯酰胺类衍生物、聚苯乙烯类衍生物。(2)无机高分子聚合物:聚合铝盐、聚合铁盐等。(3)天然高分子有机物:海藻酸钠、明胶、骨胶、壳多糖等。目前最常用的絮凝剂:有机合成的聚丙烯酰胺类衍生物,其絮凝体粗大,分离效果好,絮凝速度快,用量小,适用范围广。缺点:有一定的毒性,特别是阳离子型聚丙烯酰胺,一般不宜用于食品及医药工业。聚丙烯酸类阴离子絮凝剂,无毒,可用于食品及医药工业。絮凝效果的好坏与以下因素有关:(1)絮凝剂的用量;(2)絮凝剂的相对分子量和类型;(3)溶液的pH值;(4)搅拌速度和时间。在絮凝过程中,常需要加入一定的助滤剂以增加絮凝效果。3、混凝无机电解质和絮凝剂交叉使用,可以大大提高絮凝的效果,这种包括凝聚和絮凝机理的过程,称为混凝。四、加入助滤剂助滤剂是一种不可压缩的多孔微粒,它能使滤饼疏松,滤速增大。悬浮液中大量的细微胶体粒子被吸附到助滤剂表面上,从而改变了滤饼结构,它的可压缩性下降了,过滤阻力降低了。硅藻土、纤维素、石棉粉、珍珠岩、淀粉、活性炭等。助滤剂的使用方法有两种:一种是在过滤介质表面预涂;另一种是直接加入发酵液中混合过滤。这两种方法经常同时使用,以提高过滤速度。选择和使用助滤剂要点:(1)根据目的产物选择助滤剂品种;