大肠杆菌噬菌体的分离鉴定与初步应用的开题报告摘要：大肠杆菌（Escherichiacoli）是常见的回归菌。本研究旨在从环境样品中分离得到噬菌体，并进行鉴定和初步应用。样品经过过滤、稀释等步骤以制备扩散板，然后进行噬菌实验。成功分离得到2株噬菌体，经过形态学和生化特征的检测进行鉴定。初步应用发现该噬菌体可有效控制大肠杆菌的生长。本研究结果有望为大肠杆菌病害的防治提供新的方法。关键词：大肠杆菌；噬菌体；分离鉴定；应用一、绪论大肠杆菌是常见的回归菌，广泛存在于环境中，并且在人和动物的肠道内也常常可见。虽然大肠杆菌是一种有益的细菌，但它也能引发多种疾病，如泌尿系感染、腹泻等。目前，防治大肠杆菌病害的方法主要有化学药物和抗生素等。但使用这些方法有一定局限性和风险，因此，发展新的防治方法是有必要的。噬菌体在近年来被广泛研究，因此本研究将从环境样品中分离得到大肠杆菌噬菌体，并进行鉴定和初步应用。二、材料与方法(一)材料样品：环境中采集的大肠杆菌试剂：LB培养基、Agar、NaCl、MgSO4、葡萄糖等设备：恒温箱、离心机、UV灯(二)方法1．样品基础处理将样品筛选出大肠杆菌，用PBS缓冲液洗涤样品，离心，分装。2．制备噬菌体制备扩散板和灭菌半固体LB培养基，然后在扩散板上涂大肠杆菌，使用涂鸦法将从样品中分离出的噬菌体涂在板上。然后，将板放进恒温箱，约24小时恒温孵育，直到出现清晰的菌落。将这些菌落分离到单独的液体培养基中，培养至菌量达到一定浓度。3．鉴定对编码序列进行测序，并将RNA序列输入到BLAST软件中查找相关的文献。同样，也应测定噬菌体的形态、尺寸和初步的生化特征。4．噬菌体的应用将噬菌体添加到大肠杆菌培养基中，使用普通培养基作为对照组，使用OD值对大肠杆菌进行生长检测。三、结果成功分离得到2株大肠杆菌噬菌体，分别命名为E.coli_T1和E.coli_T2。基于BLAST测序分析，结果显示菌体E.coli_T1和E.coli_T2的RNA序列与已知噬菌体的序列具有高度同源性。使用电子显微镜观察了两株噬菌体的形态。初步生化特征检测表明，两株噬菌体可在较宽的温度和pH范围内生长。应用实验显示，这两株噬菌体可明显减缓大肠杆菌的生长速度。四、讨论与结论本研究从环境样品中成功分离得到了两株大肠杆菌噬菌体，并经过测序和形态学鉴定。初步的应用实验表明，这些噬菌体可以有效地控制大肠杆菌的生长。这些结果表明，噬菌体可能是防治大肠杆菌病害的新方法。五、参考文献Liu,J.,Zhang,L.,&Yang,L.(2019).Applicationofbacteriophagesintreatmentofhumandiseases.Microbialpathogenesis,129,79-86.Meaden,S.(2017).Phagetherapyforinfections:successstories.JournalofAntimicrobialChemotherapy,72(10),2709-2710.屈振英、王亚军、吴政涛.噬菌体及其在生物医学研究中的应用[J].中国医药科学,2016,17(16):2-4.王瑶,岳植能.噬菌体在抗生素抗性和感染控制领域的应用[J].国际外科学杂志,2019(S1):25-28.