NSCs移植联合应用NGIs基因疫苗对SCI大鼠运动功能恢复的影响的任务书任务背景：脊髓损伤（SCI）是一种造成神经功能障碍的疾病，给患者带来严重的身体和心理负担。传统的治疗方法无法从根本上治愈SCI，因此需要寻找新的治疗方式。近年来，基因治疗和干细胞治疗是SCI治疗的研究热点。其中，神经干细胞（NSCs）是在中枢神经系统中存在的一类多能干细胞，具有自我复制和多向分化能力，能够分化为神经元、星形胶质细胞、少突胶质细胞等多种类型细胞，是治疗SCI的一种有前途的手段。此外，疫苗作为一种预防疾病的有效手段，近年来被越来越多的学者应用于治疗疾病。NGIs基因疫苗是一种创新型治疗SCI的方法，能够诱导NSCs向神经元分化，并增加新生神经元的生存率。本研究将探究NSCs移植联合应用NGIs基因疫苗对SCI大鼠运动功能恢复的影响。研究目的：本研究旨在探究NSCs移植联合应用NGIs基因疫苗对SCI大鼠运动功能恢复的影响，为SCI的治疗提供新的思路和方法，为临床治疗SCI提供理论依据。研究内容：1.构建SCI大鼠模型；2.制备NGIs基因疫苗；3.制备NSCs；4.将NSCs移植到大鼠脊髓损伤部位；5.在NSCs移植后，注射NGIs基因疫苗；6.检测SCI大鼠的运动功能变化；7.对比不同处理组之间的差异。研究方法：1.构建SCI大鼠模型：选用雄性Wistar大鼠，体重200~250g。在大鼠背部进行椎板切除手术，造成SCI。术后按照Basso-Beattie-Bresnahan（BBB）评分法对大鼠的运动功能进行评估。2.制备NGIs基因疫苗：选取重组腺相关病毒（AAV）载体，克隆NGIs基因得到NGIs基因表达载体。在细胞培养基中转染原代NSCs，并收集NGIs基因表达的细胞上清。3.制备NSCs：将新生Sprague–Dawley大鼠的脑组织取出，并经过抛光、酶解、再生等步骤得到原代NSCs。NSCs经过免疫细胞化学检测，确保为干细胞。4.将NSCs移植到大鼠脊髓损伤部位：在SCI大鼠的椎板切除口处注射25万个NSCs，确保NSCs能表达特异性抗原。5.在NSCs移植后，注射NGIs基因疫苗：将NGIs基因疫苗注射到SCI大鼠的脊髓损伤部位。6.检测SCI大鼠的运动功能变化：自NSCs移植和注射疫苗后，每周对SCI大鼠进行BBB评分法评估，直至第八周。7.对比不同处理组之间的差异：将NGIs基因疫苗组、NSCs移植组、NGIs基因疫苗与NSCs移植联合应用组和对照组进行比较，分析不同处理组之间的运动功能恢复差异。研究预期结果：本研究预期结果为：NSCs移植联合应用NGIs基因疫苗能够促进SCI大鼠运动功能的恢复，且治疗效果优于单纯应用NSCs或NGIs基因疫苗。