GDNF截短异构体胞内运输及分泌的机制研究的中期报告本研究旨在探究GDNF截短异构体胞内运输及分泌的机制。在此中期报告中，我们就已有初步的实验结果进行汇报。实验设计方案：本研究选用小鼠HEK293T细胞株，将GDNF截短异构体构建成GFP融合蛋白，用Westernblotting法测定GFP-GDNF截短异构体在细胞内的表达，用荧光显微镜观察GFP-GDNF截短异构体的亚细胞定位，通过荧光共聚焦显微镜观察GFP-GDNF截短异构体的胞内运输过程，并用ELISA法测定其在培养上清中的分泌水平。实验结果：通过Westernblotting法检测到GFP-GDNF截短异构体在HEK293T细胞中有较高的表达水平。荧光显微镜观察表明，GFP-GDNF截短异构体具有明显的核质分布和囊泡状结构的累积，部分分布于高尔基体和内质网。通过荧光共聚焦显微镜观察GFP-GDNF截短异构体内部运输过程，发现GFP-GDNF截短异构体大部分运输至内质网，部分进入高尔基体和囊泡，但未发现胞浆内或细胞膜上GFP-GDNF的定位。通过ELISA法测定到GDNF-GFP截短异构体在HEK293T细胞培养上清中的分泌水平较低，这可能与细胞培养条件和细胞株有关。总结：本研究初步结果表明，GFP-GDNF截短异构体在HEK293T细胞中表达水平较高，能够有效地运输至内质网和高尔基体等细胞质中，未能发现胞浆内或细胞膜上GFP-GDNF的定位。GFP-GDNF截短异构体在HEK293T细胞培养上清中的分泌水平较低。详细探究GDNF截短异构体的胞内运输及分泌需进一步完善实验方案和方法。