mHCN4基因转染犬MSCs心脏原位移植的实验研究的开题报告一、研究背景与意义心血管疾病是目前全球最常见的慢性疾病之一，而心血管病的治疗和康复是当前世界医学科学的重要研究领域之一。由于心肌缺血、心肌梗死、心肌异位等原因导致心功能下降，不仅影响患者的生活质量，而且还威胁着其生命安全。因此，寻求一种治疗心血管疾病的有效手段显得尤为重要。干细胞是一类具有自我更新能力和分化潜能的细胞，具有广泛的应用前景。在临床应用中，干细胞主要包括胚胎干细胞和成体干细胞两大类。而在成体干细胞中，可分为骨髓干细胞、脂肪干细胞、胎盘干细胞等。研究表明，具有成体干细胞特征的间充质干细胞（MesenchymalStemCells，MSCs）具有特殊的多向分化潜能和自我修复能力，对心血管系统疾病的修复和再生潜力很大，并可促进心肌功能的恢复，是一种潜在的治疗心脏疾病的新方法。在过去的研究中发现，心脏电流门控离子通道蛋白（Hyperpolarization-activatedcyclicnucleotide-gatedionicchannelprotein，HCN）与心脏节律和起搏功能密切相关。HCN4是近年来发现的一种心脏特异表达的离子通道蛋白，已被证明具有强大的电刺激能力，在心脏节律和起搏功能方面具有重要的作用。因此，我们可以通过将mHCN4基因转染至MSCs中并进行心脏原位移植，以期提高MSCs在心脏修复和再生上的效果，为治疗心血管疾病提供更有效的手段。二、研究内容与方法1.研究内容（1）将mHCN4基因成功转染至MSCs中；（2）通过形态学、流式细胞分析等方法检测改造后的MSCs细胞形态、增殖能力、表明mHCN4基因的表达情况及其对MSCs的影响；（3）利用心脏原位移植的方法将改造后的MSCs移植到心脏病变部位进行治疗，并比较移植前后心肌收缩力、心肌病灶面积等指标的变化。2.研究方法（1）采集犬的MSCs，通过转染技术将mHCN4基因引入MSCs中；（2）通过形态学观察及流式细胞分析、免疫组化等方法检测mHCN4基因的表达情况及其对MSCs的影响；（3）通过建立犬心肌缺血模型，将改造后的MSCs原位移植到心脏病变区域，利用显微摄像技术、心电图、超声心动图等方法观察心肌收缩力、心肌病灶面积等指标的变化。三、预期成果本研究将通过mHCN4基因转染技术提高MSCs在心脏修复和再生中的效果，探讨其在治疗心血管疾病方面的应用前景。预期通过本研究的实验结果能够证实高表达mHCN4基因的MSCs既能够促进心肌细胞的增殖分化，又能够促进心肌细胞功能的恢复，从而提高心脏的功能，减轻心血管疾病的症状，为临床治疗心血管疾病提供更有效的手段。