IDOTTS介导的色氨酸代谢在ITP发病和治疗中作用的实验研究的任务书任务书一、研究背景免疫性血小板减少性紫癜(ITP)是一种常见的自身免疫疾病。该疾病的典型病理特点是因抗血小板自身抗体(autoantibodies)导致血小板减少，临床症状表现为瘀斑、皮下出血、鼻出血、口腔出血等出血或淤血现象。截至目前为止，ITP的发病机制还不十分清楚，但是有越来越多的研究表明，色氨酸代谢与ITP发病密切相关。色氨酸是一种必需氨基酸，是生物体内合成多种生物活性分子的前体物质。在色氨酸代谢途径中，IDO/TDO介导的色氨酸代谢被认为是非常重要的。IDO/TDO是色氨酸代谢中的两个限速酶，在某些情况下参与调节免疫系统、减少炎症反应。目前有研究表明，IDOTTS介导的色氨酸代谢在ITP发病和治疗中发挥着重要的作用。因此，进一步研究IDOTTS介导的色氨酸代谢在ITP发病和治疗中的作用，对于深入了解ITP的发病机制、提高治疗效果具有非常重要的意义。二、研究内容与任务1.建立ITP小鼠模型根据先前的研究，ITP可以通过注射抗血小板抗体(anti-plateletantibody)而引起。因此，本研究将按照文献报道的方法制备抗血小板抗体，并采用该方法建立小鼠ITP模型。同时，建立一组正常对照小鼠以进行对比研究。2.检测小鼠血小板计数和血清中自身抗体水平ITP小鼠模型建立后，需要检测小鼠血小板计数和血清中自身抗体水平，以确认模型的建立与血小板减少的情况。检测血小板计数采用自动血象分析仪进行，检测自身抗体水平则可以采用酶联免疫吸附实验(ELISA)。3.检测小鼠IDOTTSmRNA和蛋白表达水平通过采用实时荧光定量PCR检测小鼠IDOTTSmRNA的表达水平，同时采用免疫印迹法检测小鼠IDOTTS蛋白的表达水平。4.色氨酸代谢产物检测通过检测小鼠血清中色氨酸代谢产物的浓度，验证IDOTTS介导的色氨酸代谢与ITP发病之间的关系。检测可采用高效液相色谱法或气相色谱质谱法。5.实验干预组设置本研究将针对小鼠ITP模型采取IDO/TDO抑制剂、色氨酸酶抑制剂、NADPH氧化酶抑制剂三种药物进行干预，以观察对血小板计数和自身抗体水平的影响。三、研究意义ITP的病因和治疗一直是临床研究的热点之一。通过本研究，有望进一步明确IDOTTS介导的色氨酸代谢与ITP发病之间的关系，丰富我们对ITP发病机制的认识。同时，针对IDO/TDO抑制剂、色氨酸酶自身抗体和NADPH氧化酶抑制剂三种药物的干预，有助于拓展ITP的治疗思路，提高治疗效果。四、参考文献1.Semple,J.W.,Provan,D.,&Garvey,M.B.(2019).Immunethrombocytopenia:pathogenesis,diagnosisandtreatment.BritishJournalofHaematology,184(3),443-455.2.Mellor,A.L.,&Munn,D.H.(2004).IDOexpressionbydendriticcells:toleranceandtryptophancatabolism.NatureReviewsImmunology,4(10),762-774.3.Carlin,L.M.,Langley,S.E.,&Rooney,C.M.(2018).TheroleofHLAinhematopoieticstemcelltransplantation.Seminarsinhematology,55(4),224-233.4.Fossati,G.,Ricevuti,G.,&Edwards,S.W.(2019).Tryptophanmetabolism,inflammation,andaging.Experimentalgerontology,117,67-75.