hSHIP负调PI3KAKt信号通路对HeLa细胞增殖与凋亡的影响的开题报告一、背景PI3K/AKT信号通路在细胞的增殖、存活、代谢等过程中起重要作用。其中，PI3K是活性酶，在促进Akt磷酸化的同时，能够催化PIP2为PIP3的转化，该转化反应是PI3K/AKT信号通路的启动步骤。而AKT被激活后能够开启多种信号通路，影响各种生物学过程。过去的研究表明，PI3K/AKT信号通路的异常激活与许多癌症的发生有关。因此，阻断PI3K/AKT信号通路已成为癌症治疗的重要途径。鉴于PI3K/AKT信号通路与肿瘤的关系，研究这一信号通路在癌细胞增殖和凋亡中的作用是至关重要的。当前，对PI3K/AKT信号通路进行分子调控的方法包括靶向PI3K/AKT信号通路的特定药物和使用RNAi技术抑制相关基因表达。其中，AKT小分子抑制剂比较常用，但是其小分子特点注定了不能做片段，对于药理研究和剂量依赖性研究难度大。而RNAi技术由于消耗能量大，目前尚未实现对许多靶点的有效抑制，因此也有一定的局限性。二、研究目的本研究旨在通过构建HeLa细胞PI3K/AKT信号通路负调控模型，系统分析该信号通路在癌细胞生长和凋亡中的作用及其调节机制。三、研究方法（1）实验材料HeLa细胞PI3K抑制剂wortmannin、AKT抑制剂MK-2206（2）实验方法1.HeLa细胞培养将HeLa细胞培养在DMEM培养基中，含10%FBS和1%PSA。在37℃和5%CO2条件下培养细胞直至细胞密度适宜。2.药物处理将HeLa细胞随机分为四组，对照组、wortmannin组、MK-2206组和wortmannin+MK-2206组，分别加入不同浓度的药物后培养相应时间。3.细胞增殖实验通过MTT法检测HeLa细胞的增殖情况，并计算药物对HeLa细胞增殖的影响。4.细胞凋亡实验采用流式细胞仪检测每组细胞的凋亡率，并进行统计学分析。四、预期结果本研究预期结果为：PI3K抑制剂wortmannin和AKT抑制剂MK-2206分别对HeLa细胞增殖和凋亡产生显著的影响，同时服用wortmannin和MK-2206药物组的细胞可以对抗两种药物的作用。该结果将有助于理解PI3K/AKT信号通路在癌细胞生长过程中的作用机制，并为癌症治疗提供新的思路。