农杆菌介导的BcBCP1基因转化马铃薯抗旱性研究的中期报告本研究旨在通过农杆菌介导的转化技术，将BCP1基因转化到马铃薯中，提高其抗旱性。本报告为中期报告，主要介绍了实验设计、转化效率、PCR验证、WesternBlot检测及初步结果分析等方面的内容。实验设计本实验采用农杆菌介导的转化技术将BCP1基因转化到马铃薯愈伤组织中。具体步骤如下：1.构建载体：采用pCAMBIA2300载体，将BCP1基因克隆到该载体的多克隆位点中。2.农杆菌培养：选用AgrobacteriumtumefaciensLBA4404株转化载体。3.愈伤组织培养：将马铃薯的愈伤组织分别接种在含有0.6mg/L2,4-D和1.0mg/LBAP的MS培养基上培养4周。4.转化：将愈伤组织与已经感染了BCP1基因载体的农杆菌混合，进行共培养48小时。5.选殖：将一部分带有BCP1基因的愈伤组织放置在含有1/2MS培养基、1mg/L3-AT和100mg/Lkanamycin的培养基上，筛选出含有BCP1基因的愈伤组织。转化效率经过转化、筛选后得到了50个转化阳性的愈伤组织，转化效率约为10%。PCR验证对已经筛选出的50个转化阳性的愈伤组织进行PCR检测验证，结果表明，其中35个愈伤组织的基因组中确实存在BCP1基因，验证成功率为70%。WesternBlot检测为了更加准确地检测马铃薯愈伤组织中BCP1基因的表达情况，我们进行了WesternBlot检测。结果显示，其中25个愈伤组织中能够检测到BCP1基因的表达，表达率为50%。初步结果分析通过以上实验结果，我们可以得出以下初步结论：1.本实验成功地将BCP1基因转化到了马铃薯中，并且转化效率较高。2.采用PCR检测验证，大部分愈伤组织中确实存在BCP1基因。3.WesternBlot检测结果表明，BCP1基因在部分愈伤组织中能够得到表达。4.目前的实验进展较为顺利，下一步计划进一步鉴定转化植株的性状及抗旱性。