DEDD与Smad3相互作用负性调控TGF-β介导的生物学活性的中期报告本研究旨在探究DEDD与Smad3之间的相互作用对TGF-β介导的生物学活性的调控作用。已完成的实验包括以下几个步骤：1.病毒载体构建和包装：通过PCR扩增得到DEDD和Smad3的全长序列，并将其克隆到pLVX-IRES-ZsGreen1载体中，构建了pLVX-DEDD和pLVX-Smad3病毒载体。随后，利用包装系统将病毒载体包装成病毒颗粒。2.转染A549细胞：将构建好的病毒载体分别转染到A549细胞系中，获取DEDD和Smad3过表达的细胞系。3.Westernblotting分析：采用Westernblotting技术检测转染后A549细胞系中TGF-β介导的生物学活性的变化。结果显示，DEDD和Smad3同时过表达可以抑制TGF-β介导的Smad2/3磷酸化，并降低Smad7的表达，影响TGF-β信号通路的活性。4.Co-IP实验：通过Co-IP实验检测DEDD和Smad3是否直接相互作用。结果显示，DEDD与Smad3可以通过直接相互作用形成复合物，并削弱TGF-β信号通路的激活。以上结果表明，DEDD与Smad3的相互作用对于负性调控TGF-β介导的生物学活性具有重要作用。未来将进一步深入探究其作用机制和临床应用价值。