第一节培养基选择和配制的原则一、培养基的类型和用途二、培养基类型的选择三、培养基的配制原则四、培养基成分配比的选择四、培养基成分配比的选择第二节工业发酵培养基发酵培养基例子一、工业上常用的碳源二、工业上常用的氮源三、无机盐四、生长因子五、前体物质和促进剂抗生素发酵常用的前体物质2.发酵过程中的促进剂和抑制剂抗生素工业在发酵过程中加入某些促进剂或抑制剂，常可促进抗生素的生物合成。第三节培养基的灭菌灭菌：利用物理和化学的方法杀灭或除去物料及设备中一切生命物质的过程。消毒：用物理或化学的方法杀死物料、容器、器具内外的病原微生物，一般只能杀死营养细胞而不能杀死芽胞。消毒不一定能达到灭菌的要求，而灭菌则可达到消毒的目的。在发酵工业生产中，为了保证纯种培养，在生产菌种接种培养前，要对培养基、空气系统、消泡剂、流加物料、设备、管道等进行灭菌，还要对生产环境进行消毒，防止杂菌和噬菌体的大量繁殖。只有不受杂菌污染，发酵过程才能正常进行。干热灭菌法火焰灭菌法电磁波、射线灭菌法湿热灭菌法（主要是高压蒸汽灭菌）化学药剂灭菌法过滤除菌法药剂二、湿热灭菌的原理二、湿热灭菌的原理二、湿热灭菌的原理二、湿热灭菌的原理灭菌时间取决于污染的程度（N0）、灭菌的程度（残留菌数Nt）和k值。在培养基灭菌的过程中，除微生物被杀死外，还伴随着营养成分的破坏，如糖液焦化变色、蛋白质变性、维生素失活、醛基和氨基反应、不饱和醛聚合、一些化合物发生水解等。因此，必须选择一个既能达到灭菌的目的，又能使培养基中营养成分破坏至最小的灭菌工艺条件。由于灭菌时的活化能E大于培养基营养成分破坏的活化能E’，因此，随着温度升高，灭菌速率常数增加的倍数>培养基中营养成分分解的速率常数的增加倍数。即当灭菌温度升高时，微生物杀灭速度提高，超过了培养基营养成分破坏的速度。据测定，每升高10℃，速率常数的增加倍数为Q10。在热灭菌的过程中，同时发生微生物死亡和培养基成分破坏两个过程。温度能加速其过程进行的速度，当温度升高时，微生物死亡的速度更快，因此可以采用较高的温度，较短的灭菌时间，以减少培养基营养成分的破坏，这就是通常所说的“高温瞬时灭菌法”。灭菌温度较高而时间较短，要比温度较低时间较长效果好。对同样的培养基进行126～132℃、5～7min连续灭菌，其所得培养基质量要比采用120℃、30min的实罐灭菌好，可以得到较高的发酵水平；对同一类培养基进行120℃、20min的实罐灭菌，其所得培养基的发酵水平高于120℃、30min的对照，而同样达到灭菌的要求。三、少量培养基的灭菌手提式立式台式四、大量培养基的灭菌四、大量培养基的灭菌四、大量培养基的灭菌连续灭菌采用连消塔时，可在20～30s达到预定灭菌温度，由维持罐来保持必需的杀菌时间。采用喷射杀菌设备，蒸汽直接喷入生培养液，温度几乎立即上升到预定杀菌温度，由保温段管子的长度来保证必要的杀菌时间。采用板式换热器，可在20s内达到杀菌温度，经保温保持必要的杀菌时间，然后再板式热交换器另一段20s内冷却到发酵温度。间歇灭菌即实消，是在每批培养基全部流入发酵罐后，就在罐内通入蒸汽加热至灭菌温度，维持一定时间，将发酵罐和培养基同时灭菌，再冷却到接种温度备用。其它灭菌设备一般采用蒸汽灭菌，如设备十分耐压，则可采用较高温度，但必须注意设备内部的凹处及露出的小配管等蒸汽不能到达的部位。有些设备也可采用SO2熏蒸灭菌，如葡萄酒发酵池、罐等。（在夹套中）关好空气阀，蒸气上进下出，冲蒸气，压力大于2kg/cm2（120℃），最好是4～5kg/cm2（160℃）。当罐内温度>80℃，进蒸气口（蒸气阀）关掉，出蒸气口（排气阀）关小。打开空气阀，蒸气直接进罐，121℃，20～30min。从80℃～100℃上升很快，大于100℃后温度上升很慢，到118℃时就开始计时，到计时25min时立即关掉蒸气阀。关掉蒸气阀后通入无菌空气，使罐内一直保持正压（高于大气压，空气不会倒灌入罐内）。（在夹套中）立即加自来水冷却，从下向上，使温度尽快降到55℃左右，到37～38℃时关掉水，也有缓冲性。先蒸煮灭菌，但固体培养基呈粒状、片状或粉状，流动性差，不易翻动，吸水加热易成团，冷却困难。针对这些特点设计的转鼓式灭菌机常用于酒厂、罐等。培养基成分pH值培养基中的颗粒泡沫油脂、糖类及一定浓度的蛋白质增加微生物的耐热性，高浓度有机物会包于细胞周围形成一层薄膜，影响热的传递；因此，在固形物含量高的情况下，灭菌温度可高些。pH值对微生物的耐热性影响很大。pH值6.0～8.0，微生物最耐热；pH值<6.0，氢离子易渗入微生物细胞内，从而改变细胞的生理反应促使其死亡。所以，pH值愈低，灭菌所需的时间愈短。培养基中的颗粒小，灭菌容易；颗粒