MicroRNA-877在肾癌中的表达及其机制研究的任务书任务书题目：MicroRNA-877在肾癌中的表达及其机制研究研究背景和意义：肾癌是一种高度恶性的肿瘤，其发病率在近年来呈逐年上升趋势，已成为困扰人类健康的一个严重问题。MicroRNA-877(简称miR-877)是一种小分子RNA，其在人体细胞中具有重要的生物学功能，可以调控细胞的生长、分化、凋亡等过程。许多研究表明，miR-877可能在肾癌的发生和发展中起着重要的作用，但是其具体的作用机制还不十分清楚，需要进行进一步深入的研究。研究目标：本研究旨在探究miR-877在肾癌中的表达情况及其调控机制，为深入了解肾癌的发病机制提供新的参考依据，为肾癌的防治提供理论基础。研究内容：1.搜集相关文献，了解miR-877在肾癌中的表达情况及其生物功能。2.采集肾癌患者和健康人群的肾组织标本，通过实时荧光定量PCR技术检测miR-877在肾癌组织和正常对照组织中的表达水平，比较两者的差异。3.通过生物信息学方法预测miR-877可能调控的靶基因，并利用Westernblot技术检测这些靶基因在肾癌组织和正常对照组织中的表达水平。4.利用体外细胞实验技术，验证miR-877对靶基因表达的调控作用，并探究其对肾癌细胞的生长、凋亡、细胞周期等生物学特性的影响。5.分析miR-877在肾癌中的作用机制，并探讨其在临床诊治中的应用前景。研究方法：1.实时荧光定量PCR技术：采用TaKaRaSYBR®PremixExTaq™II试剂盒，根据说明书进行PCR反应。反应体系：20μL，包括10μL的2×SYBR®PremixExTaq™II，0.4μL的ROX参比染料，1μL的模板DNA，0.8μL的每个引物（10μmol/L），7.8μL的去离子水。2.生物信息学方法：通过miRanda、TargetScan等软件预测miR-877可能调控的靶基因。3.Westernblot技术：采用标准Westernblot方法进行实验。主要步骤：蛋白质提取、电泳分离、转移到PVDF膜，孵育一抗和二抗，化学发光等。4.细胞实验：采用MTT法、流式细胞术等技术，研究miR-877对肾癌细胞的影响。预计结果：通过检测miR-877在肾癌组织和正常对照组织中的表达情况，可以初步了解其在肾癌发生和发展中的作用。结合生物信息学分析和体外细胞实验结果，可以较全面地探究miR-877在肾癌中的调控机制，并为肾癌的临床诊治提供新的参考依据。参考文献：1.ZhangM,etal.MiR-877inhibitscellproliferationandmetastasisinrenalcellcarcinomabydirectlytargetingIGF2BP2[J].CellProliferation.2018;51(6):e12508.2.ZhaoW,etal.MicroRNA-877actsasatumorsuppressorbydirectlytargetingeEF2Kinrenalcellcarcinoma[J].OncolLett.2019;18(4):4153-60.3.HuangY,etal.ThesurveyofmicroRNA-877expressionlevelinhumancancertypesanditsclinicalsignificanceincancerpatients:abioinformaticanalysisofpublicrepositories[J].JournalofTranslationalMedicine.2020;18(1):368.