Contents5.1现代生物(shēngwù)技术概述现代生物(shēngwù)技术定义现代(xiàndài)生物技术定义5.1现代生物技术(jìshù)概述现代生物技术(jìshù)及应用现代(xiàndài)生物技术及应用现代生物(shēngwù)技术及应用5.1现代(xiàndài)生物技术概述现代环境(huánjìng)生物技术现代环境(huánjìng)生物技术包括(bāokuò)以下三方面现代环境(huánjìng)生物技术现代(xiàndài)环境生物技术现代(xiàndài)环境生物技术现代(xiàndài)环境生物技术现代(xiàndài)环境生物技术现代(xiàndài)环境生物技术现代环境(huánjìng)生物技术现代环境(huánjìng)生物技术现代(xiàndài)环境生物技术5.2酶工程基本原理5.2酶工程基本原理5.2酶工程基本原理酶固定化概念(gàiniàn)酶固定化概念(gàiniàn)酶固定化概念(gàiniàn)酶固定化概念(gàiniàn)酶固定化概念(gàiniàn)酶固定化概念(gàiniàn)酶固定化概念(gàiniàn)酶固定化概念(gàiniàn)酶固定化概念(gàiniàn)酶固定化概念(gàiniàn)酶固定化概念(gàiniàn)酶固定化概念(gàiniàn)酶固定化概念(gàiniàn)酶固定化概念(gàiniàn)酶固定化概念(gàiniàn)酶固定化概念(gàiniàn)酶固定化概念(gàiniàn)酶固定化概念(gàiniàn)酶固定化概念(gàiniàn)酶固定化概念(gàiniàn)酶固定化概念(gàiniàn)酶固定化概念(gàiniàn)酶固定化概念(gàiniàn)酶固定化概念(gàiniàn)酶固定化概念(gàiniàn)酶固定化概念(gàiniàn)酶固定化概念(gàiniàn)固定化酶反应(fǎnyìng)动力学固定化酶反应(fǎnyìng)动力学固定化酶反应(fǎnyìng)动力学固定化酶反应(fǎnyìng)动力学固定化酶反应(fǎnyìng)动力学固定化酶反应(fǎnyìng)动力学固定化酶反应(fǎnyìng)动力学固定化酶反应(fǎnyìng)动力学5.3基因工程(jīyīngōngchéng)概述5.3.1基因工程(jīyīngōngchéng)概述基因工程的诞生在技术理论上得益于三大发明：①Smith、Wilcox（1970）和Boyer（1972）等发现了限制性核酸内切酶和Khorana(1970)等发现了DNA连接酶，使DNA分子的切割和连接成为可能，从而为基因工程的技术操作奠定了良好的基础(jīchǔ)；②Lederberg(1946)发现细菌的F-性因子，以后相继发现和建立了其它外源基因运载体，Cohen（1973）首次将质粒作为基因工程的运载体使用；③Baltimore和Temin(1970)等人发现了逆转录酶，打破了中心法则，使真核基因的制备成为可能。具备了以上的理论与技术基础，基因工程诞生的条件已经成熟。1972年Berg(伯格)等人在世界上首次进行了DNA的体外重组，得到了包含SV40和λDNA的重组DNA分子。1973年Cohen(科恩)等人将编码卡那霉素的质粒DNA和编码四环素抗性的基因进行重组并转化(zhuǎnhuà)大肠杆菌，结果转化(zhuǎnhuà)菌同时表现出了卡那霉素和四环素的双重抗性，至此基因工程技术宣告诞生。随着分子生物学基础技术的发展，随后又出现了杂交技术、序列测定技术、PCR技术等一系列新技术，从而使基因工程技术日臻完善，⑵基因工程(jīyīngōngchéng)的定义目前基因工程的发展极为迅速，为生物学、医学、农学和环境科学等学科(xuékē)的理论研究及工业、农业和人类日常生活都带来了革命性的变化，其意义毫不逊色于有史以来任何一次技术革命，概括起来体现在以下三个方面：①用于大规模生产生物分子；②改造现有物种及设计构建新物种；③寻找、分离和鉴定生物体的遗传信息资源。⑶基因工程的主要(zhǔyào)内容DNA重组(zhònɡzǔ)流程示意图获得含有重组载体的细胞后，通过大量培养重组细胞，可以获得目的基因的大量拷贝或目的基因的表达产物。通常将来自于同一(tóngyī)始祖的一群相同分子、细菌、细胞或动物称为克隆，获取大量单一克隆的过程称为克隆化，也称无性繁殖。广义的重组DNA技术不仅包括DNA体外重组技术及操作过程，还包括表达产物的后续处理过程和技术，如：蛋白质的分离纯化、5.3.2目的(mùdì)基因的获得①基因的随机断裂方法采用一定的理化方法将基因组DNA随机断裂，可以得到大小基本一致的DNA片段。这些方法有用专一性核酸酶酶解，化学处理或普遍使用的机械切割法。DNA在溶