一氧化氮合酶在大鼠肺移植缺血再灌注损伤中的作用研究的任务书任务名称：一氧化氮合酶在大鼠肺移植缺血再灌注损伤中的作用研究研究目的：探讨一氧化氮合酶在大鼠肺移植过程中缺血再灌注损伤中的作用及其机制，为临床肺移植手术提供基础研究支持。研究内容：1.建立缺血再灌注损伤大鼠肺移植模型，观察肺移植后一氧化氮合酶的表达变化。2.通过酶活性测定、Real-timePCR和Westernblot等方法分析一氧化氮合酶在肺移植中的作用及其机制。3.进一步观察一氧化氮合酶在肺移植后各个时间点的表达情况，并探究一氧化氮合酶与氧化应激的关系。4.尝试修饰一氧化氮合酶的某些关键位点，探讨它们与一氧化氮合酶功能的关系。预期成果：1.探讨一氧化氮合酶在肺移植中的作用及其机制，为肺移植的临床手术提供理论支持。2.建立人工合成一氧化氮合酶功能区，从而为疾病治疗提供新的思路和方法。策略与方法：1.建立大鼠肺移植模型，通过采用左右肺双肺供体肺移植方法，腹主动脉与下腔静脉直接吻合，肺门处脉管吻合，构建出缺血再灌注损伤大鼠肺移植模型，运用病理学方法探究肺移植后各个时间点的价值改变程度及其相关因素。2.从大鼠肺芯片中筛选出一氧化氮合酶表达及其协同蛋白，利用筛选到的靶蛋白先后采用酶活性测定、Real-timePCR、Westernblot等方法，探讨一氧化氮合酶在肺移植过程中的作用及其机制。3.运用大鼠肺移植模型，通过病理学和免疫荧光技术观察一氧化氮合酶在移植后各个时间点的表达情况，并探究一氧化氮合酶与氧化应激的关系等。4.通过突变技术对一氧化氮合酶关键位点进行修饰，探究它们与一氧化氮合酶功能的关系，并分析这些修饰对一氧化氮合酶的活性、稳定性和定向性的影响。5.综合以上内容，对所得数据进行统计学分析和综合评价，完成本研究的报告撰写论文，并撰写出第一作者文章。时间安排：第一阶段：制备肺移植模型，6个月内完成。第二阶段：对锤炼遭受肺移植大鼠肺芯片进行筛选和分析，4个月内完成。第三阶段：运用大鼠肺移植模型进行相关研究，6个月内完成。第四阶段：进行修饰技术相关研究，3个月内完成。第五阶段：统计分析数据并进行报告撰写论文，3个月内完成。总时限：22个月。