常用免疫组化试剂介绍一、用于鉴别诊断(一)上皮源性:1、细胞角蛋白/cytokeratin、CK:目前,商品化得细胞角蛋白有20多种,不同得分子量代表不同类型得上皮标志。通常将CK分为两大类型:Ⅰ型(低分子量);Ⅱ型(高分子量)。理论上讲,大多数单层上皮表达低分子量得CK;复层上皮多表达高分子量得CK;移形上皮(膀胱)与假复层上皮(呼吸道得被覆上皮)既表达低分子量得CK,也表达高分子量得CK。在癌组织中,低分子量得CK多在腺癌中表达,高分子量得CK多在鳞癌中表达。目前为止,未发现任何一种上皮只含有一种CK,某些上皮可含210种不同分子量得CK。因此,目前试图应用单一得CK免疫表型来确定某种特定得上皮性肿瘤就是不可能得。同样,应用CK来区别腺癌、类癌与间皮瘤也就是困难得。因此,CK得免疫组化结果判断就是一个较为复杂得问题,在应用这类标记物作为腺癌与鳞癌得鉴别应特别注意。有必要时,应联合用多种CK加以综合判断。CK得阳性表达还包括有间变癌、双向分化得滑膜肉瘤、脊索瘤、胚胎癌、间皮瘤、上皮样肉瘤、胸腺瘤等。CK得阴性表达有:副节瘤单向分化得滑膜肉瘤、软骨(肉)瘤、精原细胞瘤、淋巴瘤、脑膜瘤、恶黑、恶纤组、软组织肉瘤(除特殊类型外)。在判断CK免疫组化结果时应注意几点:(1)CK得单克隆抗体优于多克隆抗体;(2)CK常出现斑点状得假阳性反应,应注意识别;(3)虽然大多数CK多在胞浆表达,但CK17多在胞核表达;(4)绝大多数CK抗体需用胰酶消化,可增加阳性表达率与染色强度;(5)部分非上皮性肿瘤(平滑肌肉瘤)可见有CK表达,在诊断时应注意;(6)淋巴结、扁桃体与脾组织中得滤泡外得网织细胞含有CK8与18以及desmin,在判断淋巴结转移癌与肌源性肉瘤转移时应根据组织学综合判断。2、上皮膜抗原(epithelialmembraneantigen/EMA):EMA就是上皮细胞分泌得一种乳脂小球膜糖蛋白,广泛存在于人体各种上皮细胞中(也存在于间皮细胞、浆细胞、组织细胞与T细胞淋巴瘤中),其分布与角蛋白相似,但对内脏腺上皮优于细胞角蛋白,尤其就是分化差得癌EMA有时可呈强阳性表达。EMA可作为上皮源性肿瘤得常用标记物。EMA阳性表达得肿瘤有鳞癌、胃肠道腺癌、乳腺癌、前列腺癌、卵巢癌、间皮瘤、滑膜肉瘤、甲状腺乳头状癌、上皮样肉瘤等。在判断EMA免疫组化结果时应注意几点:(1)EMA虽然就是上皮细胞非常敏感得标记,但一些非上皮性肿瘤(如浆细胞、组织细胞与T细胞淋巴瘤)也可阳性表达。因此在癌与其她间叶性肿瘤鉴别时不能作为唯一得参考标记;(2)EMA对内脏上皮源性肿瘤得敏感性优于体表上皮源性肿瘤,因此在腺癌中得表达明显高于鳞癌。3、桥粒蛋白:就是上皮细胞特有得结构,就是一种广谱得上皮性标记。鳞癌、腺癌、移形细胞癌、未分化癌与间皮瘤、尤文氏肉瘤表达。在判断桥粒蛋白免疫组化结果时应注意几点:(1)桥粒蛋白也可在心肌、脑膜瘤、卵巢得颗粒细胞瘤与淋巴结得网织细胞中表达;(2)甲状腺间变癌阳性表达率低;(3)冰冻切片效果优于石蜡切片。(二)间叶源性肿瘤得标记1、波形蛋白Vimentin:就是一种5258得胞浆蛋白。主要分布于间叶细胞及其起源得肿瘤,就是间叶细胞及其肿瘤得特异性标记。横纹肌肉瘤、平滑肌肉瘤与非肌源性软组织肿瘤如纤维肉瘤、脂肪肉瘤、血管肉瘤、恶纤组、精原细胞瘤、雪旺氏瘤与骨肿瘤Vimentin就是一个关键标记。此外,血管球瘤、颗粒细胞肌母细胞瘤、淋巴瘤、白血病与恶黑等均可有Vimentin表达。在判断Vimentin免疫组化结果时应注意几点:(1)部分肿瘤(如间皮瘤、滑膜肉瘤、乳腺癌、肺腺癌等)除Vimentin(+)表达外,可同时又有cytokeratin得表达。应结合其组织学形态加以诊断。(2)福尔马林固定得组织标本,vimentin假阴性并不少见,冰冻切片酒精固定得组织可提高其敏感性与可靠性;(3)vimentin不能单独用于软组织肿瘤得诊断,多提倡与其她特异性标记物联合使用。2、结蛋白desmin:就是一种分子量为5055ku得细胞浆蛋白,胚胎与成人横纹肌或平滑肌及其肿瘤均可表达。子宫、皮肤、胃肠道及其她部位得平滑肌多呈(+)表达。现已发现desmin在良性肿瘤得阳性率与染色强度明显高于恶性肿瘤;高分化得平滑肌肉瘤与染色强度明显高于低分化得平滑肌肉瘤。Suster报道5例皮肤就是上皮性平滑肌肉瘤均为,而actin与vimentin均为(+)反应。因此目前认为,多应用配套抗体,即与其她肌源性抗体联合应用,不能只根据desmin来排除平滑肌肉瘤得诊断。在判断desmin免疫组化结果时应注意几点:(1)非常原始得肌源性肿瘤常不表达desmin;(2)某些非肌源性肿瘤也有desmin表达,如纤维肉瘤、恶纤组、腺泡状软组织肉瘤与个别腺癌(3)常规福