人BCMA基因的克隆、表达及抗体制备的中期报告.docx
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人BCMA基因的克隆、表达及抗体制备的中期报告尊敬的评审专家,本研究计划从人源中获得BCMA基因,克隆BCMA编码DNA序列并进行表达,最终制备出高亲和力的BCMA抗体。在进行实验前,我们从NCBI数据库中获得了人BCMA基因的核苷酸序列,并设计出了一对引物用于PCR扩增BCMA基因的全长编码序列。经过PCR扩增、回收、纯化后,我们将BCMA基因的编码序列克隆到了表达载体pET28a中。随后,我们使用大肠杆菌作为宿主菌对表达载体进行转化,并进行相关的操作使其表达人BCMA蛋白。在SDS-PAGE分析中,我们发现在感光剂下有明确的表达条带。我们使用尿素和柱层析方法对蛋白进行了纯化,得到了较纯的BCMA蛋白。接下来,我们开始制备抗体。首先,我们将高纯度的BCMA蛋白注射到小鼠体内进行免疫。经过免疫、淋巴细胞融合、筛选和克隆等步骤,我们获得了多株BCMA抗体。Westernblotting实验结果表明,这些抗体可以特异性地识别BCMA蛋白。目前,我们正在进行对BCMA抗体的更加详细的特性分析,并优化制备方案,以获得更高亲和力和更高效的抗体。感谢您的耐心阅读,如有任何问题,请随时联系我们。
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