miR-21在子宫内膜癌Ishikawa细胞中的表达及其对P53的调节作用的开题报告一、研究背景及意义子宫内膜癌是一种有恶性生长趋势的肿瘤，它主要在女性的子宫腔内端ometrium中形成。目前，全球范围内子宫内膜癌的患病率不断上升，成为常见的妇科恶性肿瘤之一。虽然在治疗手段和技术上都取得了一定的进展，但是对于肿瘤的病理生理基础依然了解不足。miRNA是一种短小的RNA分子，可以通过对mRNA靶点的负调控，来间接地影响蛋白质的表达。大量的研究表明，在多种肿瘤中都存在着miRNA发生异常变化的现象，然而，探究miRNA和肿瘤之间的关系依然充满了挑战和不确定性。在先前的研究中，miR-21被认为在多种肿瘤中表达升高，其表达水平的变化与肿瘤细胞的侵袭性和癌细胞对化疗药物的敏感性密切相关。除此之外，miR-21的表达水平还受到着多种调节因素的影响，包括p53。p53基因蛋白是一个重要的肿瘤抑制因子，在细胞发生DNA损伤时会被激活并参与调节细胞周期和DNA修复。然而，近年来发现在一些癌细胞中，p53的基因表达发生异常变化，从而导致其失去其肿瘤抑制功能。这种现象在子宫内膜癌的研究中也得到了一定的关注。因此，本研究将探究miR-21在子宫内膜癌Ishikawa细胞中的表达特征，以及其与p53的相互关系，希望研究结果能为子宫内膜癌的发生机制和治疗提供重要的参考价值。二、研究方法1.细胞培养和干扰病毒构建通过Ishikawa细胞系，构建miR-21敲低和miR-21过表达的Ishikawa细胞系。同时，获取p53敲低和p53过表达的Ishikawa细胞系。利用Westernblot和qPCR技术验证目标基因的表达水平变化。2.RNA干扰和逆转录实时荧光PCR突变细胞株中表达miR-21和p53的表达量将被通过RNA干扰的手段被降低。所有实验都将包括对照组和实验组，以确保结果的准确性。3.细胞增殖、侵袭性实验及细胞周期分析细胞增殖和侵袭性实验将通过MTT和Transwellassay技术进行实验验证。细胞周期则通过流式细胞术进行分析。三、研究预期成果本研究预期通过对子宫内膜癌Ishikawa细胞系中miR-21及其调控因子p53的研究，揭示miR-21在细胞增殖及侵袭性中的作用机制，并探究其与p53之间的相互关系。研究结果可为子宫内膜癌病理生理的深入了解和治疗发展提供参考依据。