广西大学仪器使用与土壤农化分析实验报告专业：果树学年级：2012级实验时间：2013-05-10姓名：安振宇学号：1217304001实验二液相色谱基本定性定量分析一、目的要求1、熟悉液象色谱仪器操作。2、学会对液象色谱数据结果进行定性、定量分析。3、学会对谱图中目标物的峰形进行评价，原因分析。二、基本原理试样用流动相溶解，以乙睛+水}乙酸为流动相，使用C.18为填料的不锈钢柱和紫外检测器（290nm)，对试样中的毒死蟀进行反相高效液相色谱分离和测定。在一定的色谱条件下，一个未知物只有一个确定的保留时间。因此，对于较简单的多组分混合物，若其中所有待测组分均为已知，它们的色谱峰均能分开，则可将已知纯物质在相同的色谱条件下的保留时间与未知物的保留时间进行比较，就可以定性鉴定未知物。纯物质对照法定性只适用于组分性质已有所了解，组成比较简单，且有纯物质的未知物。当未知样品中组分较多，所得色谱峰过密，用上述方法不易辨认时，或仅作未知样品指定项目分析时均可用此法。首先做出未知样品的色谱图，然后在未知样品加入某已知物，又得到一个色谱图。峰高增加的组分即可能为这种已知物。三、仪器及设备高效液相色谱仪:具有可变波长紫外检测器，色谱数据处理机;色谱柱:200mmX4.6mm(内径)不锈钢柱，内装C18、5μm填充物(或具等同效果的色谱柱);过滤器:滤膜孔径约0.45μm微量进样器:50μL定量进样管:5μ;超声波清洗器。四、实验试剂：40%毒死蜱乳油：0.1042g,甲醇定容至100ml,进样量5ul,五、实验条件流量:1.0mL/min;检测波长:290nm;进样体积:5μL保留时间:6.5min;柱温:.温(温差变化应不大于2℃)。六、实验步骤1、仪器硬件的基本介绍。2、仪器软件的基本介绍。3、进标样，得出色谱图。4、数据分析。七、结果处理：目标物(40%毒死蜱乳油)的定性、定量分析：保留时间面积%面积高度积分类型开始时间结束时间基线开始基线结束斜率漂移%高峰内点数宽度开始高度结束高度曲线ID峰Lambda最大12.318222630.972818BB2.1372.3572.1372.357-1.514564e-0023.214698e-0021.1213213.199000312.722.388260271.136415BV2.3582.4502.3583.2684.085692e-003-1.319053e-0022.55555.500045270200.232.487769463.345283VV2.4502.7882.3583.2684.085692e-003-1.319053e-0022.1020320.299452722180204.942.865778503.3813093VV2.7882.9832.3583.2684.085692e-003-1.319053e-0025.2111711.699221831060203.753.035283761.233839VB2.9833.2682.3583.2684.085692e-003-1.319053e-0021.5317117.099310600206.163.94727110.12483BB3.8684.0903.8684.0902.978975e-004-1.041565e-0030.1913313.299000209.674.646141120.611674BB4.5004.8414.5004.8418.688636e-004-3.829560e-0030.6720520.499000222.685.484157224268.29177772BV5.2965.7205.2966.3352.124226e-004-1.016514e-00370.7025425.3980204430200.295.82748187820.9340080VB5.7206.3355.2966.3352.124226e-004-1.016514e-00315.9436936.8972044300200.2（一）样品的数据分析样品保留时间峰基宽40%毒死蜱乳油：甲醇tR8=5.484tR9=5.827W8=0.424W9=0.615从流出曲线上可以得到如下的信息：根据色谱峰的数目，得知该试样中至少含有多少组分；根据色谱峰的位置，即利用保留值可以进行定性鉴定；根据峰面积或峰高，可以进行定量分析；根据峰的保留值和峰宽，可对色谱柱的分离效能作出评价本实验峰型良好，较符合。其在290nm，R=5.484；229.6nm,R在2-2.2处有最大吸收值。（二）求分离度已知半峰宽Y1/2==2.354