野生稻内生固氮菌筛选及固氮新种的确定的任务书任务背景：稻（OryzasativaL.）是全世界最主要的粮食作物之一，是世界上大多数人口的主要食品来源之一。然而，稻田土壤中缺乏可利用的氮源使得稻作生产受到了很大的影响。传统的氮肥施用虽然可以提高稻作的产量，但是成本高，而且对环境也有负面影响。因此，研发高效的低成本代替氮肥的方法是一个重要的研究方向。利用稻田自然界存在的内生固氮菌，可以让稻田自然地补充氮源。因此本任务旨在从稻田土壤中筛选出高效稳定的野生型内生固氮菌，并确定其分类学地位。任务目标：1.通过对野生稻内生固氮菌的筛选，发掘高效稳定的种质资源。2.通过多种指标对筛选出的固氮菌菌株进行评价，并确定最优菌株。3.利用系统学、生化和分子生物学等多种手段，确定有代表性的菌株的分类学地位。任务内容：1.采集稻田土壤样品，分离筛选野生稻内生固氮菌，并筛选出高效稳定的菌株保持备用。2.对筛选出的菌株进行形态孔径学特征、菌株培养特性及荧光抗性等多种生理生化性质指标测定，并筛选出性状好的菌株。3.应用固氮指标测定方法对筛选出的菌株进行测定，筛选出固氮能力高的菌株。4.根据菌株的形态特征及固氮指标测定结果，选取10个最优固氮菌株进行16SrRNA序列比对，并进行分析。5.确定野生稻内生固氮菌的分类学地位，将新种信息上传到国内和国际微生物基因序列数据库。任务方法：1.采集稻田土壤样品，分离野生稻内生固氮菌并储存备用。2.观察和研究菌株的形态特征，通过培养特性和荧光抗性等生理生化性质对菌株进行分类。3.应用比色法和测氮仪等方法测试菌株固氮能力，筛选出高效稳定的菌株。4.应用16SrRNA分子生物学方法分析35°C下野生稻内生固氮菌的菌株和普通土壤中的固氮菌，进行DNA提取、PCR扩增、图形分析、序列比对等操作，筛选出有代表性的菌株。5.根据16SrRNA序列比对结果及分类学信息，对新种进行鉴定。6.上传最终的鉴定结果到有关微生物基因序列数据库中，以便大家可以访问到最新的数据。任务计划：1.野生稻内生固氮菌筛选：2周2.菌株培养特性及荧光抗性等生理生化性质测定：3周3.固氮指标测定：2周4.16SrRNA序列分析与比对：3周5.新种鉴定：1周6.数据上传：1周7.数据分析和报告撰写：2周总计9周任务意义：本任务对于展示微生物多样性、发掘潜在优良菌株资源、保护稻田生态环境提供了实质性的推动。同时，研究还将对国家绿色发展和环保型农业产生积极的推动作用，发展出适合中国农业现状的生物技术方法，在农业领域创造新的技术和经济效益。