oIFN-tau在E.Coli中的可溶性表达及其活性的初步研究的中期报告.docx
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oIFN-tau在E.Coli中的可溶性表达及其活性的初步研究的中期报告本次研究旨在在大肠杆菌(E.Coli)中表达并分析IFN-tau的可溶性表达和活性。本文介绍了中期研究的进展情况。制备重组IFN-tau1.获得IFN-tau基因:使用PCR方法从牛胎盘中提取DNA,扩增IFN-tau基因,将其插入到原核表达载体pET-28a(+)中。2.E.Coli的转化和重组蛋白表达:将表达载体pET-28a(+)重组IFN-tau转化到E.Coli菌株中,通过IPTG诱导表达。3.蛋白纯化:使用亲和层析法纯化获得重组IFN-tau蛋白。可溶性表达的分析1.SDS-PAGE分析:从细菌中提取细胞裂解物和可溶性分数样品,用SDS-PAGE分析其蛋白质组成。2.westernblot分析:使用westernblot检测重组蛋白是否正确折叠,并且是否具有IFN-tau的抗体活性。结果及讨论1.SDS-PAGE分析表明,重组IFN-tau的分子量约为20kDa,与理论值相符。此外,重组IFN-tau在可溶性和胞内分数均有表达。2.westernblot分析表明,重组IFN-tau的抗体活性较差,需要进一步优化。结论我们成功地在E.Coli中表达了可溶性的重组IFN-tau,并获得IFN-tau的蛋白质组成信息。但是,我们需要进一步优化抗体的活性。此外,我们计划将进一步研究IFN-tau在体外抗病毒和免疫调节方面的功能。
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