布鲁氏菌病防治技术规范布鲁氏菌病(Brucellosis,也称布氏杆菌病,以下简称布病)就是由布鲁氏菌属细菌引起得人兽共患得常见传染病。我国将其列为二类动物疫病。为了预防、控制与净化布病,依据《中华人民共与国动物防疫法》及有关得法律法规,制定本规范。1适用范围本规范规定了动物布病得诊断、疫情报告、疫情处理、防治措施、控制与净化标准。本规范适用于中华人民共与国境内一切从事饲养、经营动物与生产、经营动物产品,以及从事动物防疫活动得单位与个人。2诊断2、1流行特点多种动物与人对布鲁氏菌易感。布鲁氏菌属得6个种与主要易感动物见下表:种主要易感动物羊种布鲁氏菌(Brucellamelitensis)羊、牛牛种布鲁氏菌(Brucellaabortus)牛、羊猪种布鲁氏菌(Brucellasuis)猪绵羊附睾种布鲁氏菌(Brucellaovis)绵羊犬种布鲁氏菌(Brucellacanis)犬沙林鼠种布鲁氏菌(Brucellaneotomae)沙林鼠布鲁氏菌就是一种细胞内寄生得病原菌,主要侵害动物得淋巴系统与生殖系统。病畜主要通过流产物、精液与乳汁排菌,污染环境。羊、牛、猪得易感性最强。母畜比公畜,成年畜比幼年畜发病多。在母畜中,第一次妊娠母畜发病较多。带菌动物,尤其就是病畜得流产胎儿、胎衣就是主要传染源。消化道、呼吸道、生殖道就是主要得感染途径,也可通过损伤得皮肤、黏膜等感染。常呈地方性流行。人主要通过皮肤、黏膜、消化道与呼吸道感染,尤其以感染羊种布鲁氏菌、牛种布鲁氏菌最为严重。猪种布鲁氏菌感染人较少见,犬种布鲁氏菌感染人罕见,绵羊附睾种布鲁氏菌、沙林鼠种布鲁氏菌基本不感染人。2、2临床症状潜伏期一般为14～180天。最显著症状就是怀孕母畜发生流产,流产后可能发生胎衣滞留与子宫内膜炎,从阴道流出污秽不洁、恶臭得分泌物。新发病得畜群流产较多;老疫区畜群发生流产得较少,但发生子宫内膜炎、乳房炎、关节炎、胎衣滞留、久配不孕得较多。公畜往往发生睾丸炎、附睾炎或关节炎。2、3病理变化主要病变为生殖器官得炎性坏死,脾、淋巴结、肝、肾等器官形成特征性肉芽肿(布病结节)。有得可见关节炎。胎儿主要呈败血症病变,浆膜与黏膜有出血点与出血斑,皮下结缔组织发生浆液性、出血性炎症。2、4实验室诊断2、4、1病原学诊断2、4、1、1显微镜检查采集流产胎衣、绒毛膜水肿液、肝、脾、淋巴结、胎儿胃内容物等组织,制成抹片,用柯兹罗夫斯基染色法染色,镜检,布鲁氏菌为红色球杆状小杆菌,而其它菌为蓝色。2、4、1、2分离培养新鲜病料可用胰蛋白月示琼脂面或血液琼脂斜面、肝汤琼脂斜面、3%甘油0、5%葡萄糖肝汤琼脂斜面等培养基培养;若为陈旧病料或污染病料,可用选择性培养基培养。培养时,一份在普通条件下,另一份放于含有5～10%二氧化碳得环境中,37℃培养7～10天。然后进行菌落特征检查与单价特异性抗血清凝集试验。为使防治措施有更好得针对性,还需做种型鉴定。如病料被污染或含菌极少时,可将病料用生理盐水稀释5～10倍,健康豚鼠腹腔内注射0、1～0、3mL/只。如果病料腐败时,可接种于豚鼠得股内侧皮下。接种后4～8周,将豚鼠扑杀,从肝、脾分离培养布鲁氏菌。2、4、2血清学诊断2、4、2、1虎红平板凝集试验(RBPT)(见GB/T18646)2、4、2、2全乳环状试验(MRT)(见GB/T18646)2、4、2、3试管凝集试验(SAT)(见GB/T18646)2、4、2、4补体结合试验(CFT)(见GB/T18646)2、5结果判定县级以上动物防疫监督机构负责布病诊断结果得判定。2、5、1具有2、1、2、2与2、3时,判定为疑似疫情。2、5、2符合2、5、1,且2、4、1、1或2、4、1、2阳性时,判定为患病动物。2、5、3未免疫动物得结果判定如下:2、5、3、12、4、2、1或2、4、2、2阳性时,判定为疑似患病动物。2、5、3、22、4、1、2或2、4、2、3或2、4、2、4阳性时,判定为患病动物。2、5、3、3符合2、5、3、1但2、4、2、3或2、4、2、4阴性时,30天后应重新采样检测,2、4、2、1或2、4、2、3或2、4、2、4阳性得判定为患病动物。布鲁氏菌病虎红平板凝集试验操作规程1范围本标准规定了布鲁氏菌病虎红平板凝集试验得操作技术要求本标准适用于各种家畜布鲁氏菌病筛选试验。2试剂与材料2、1试剂2、1、1抗原与血清:按照说明书使用,使用前置室温(22℃~25℃)30min~60min,并充分摇匀。2、2材料2、2、1玻璃板:约45cm×30cm,要求洁净,划成32个方格,横数8个格,纵数4个格,每格4×4cm,每一格下再划1cm宽得小格,用于填写血清号。2、2、2牙签:扁形圆头或