克氏原螯虾C型凝集素的表达与功能研究的中期报告.docx
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克氏原螯虾C型凝集素的表达与功能研究的中期报告本研究在前期成功克隆获得了克氏原螯虾(Procambarusclarkii)C型凝集素基因,并利用真核表达系统进行表达和纯化。在本期研究中,我们对该C型凝集素的生物学活性进行了初步研究。首先,我们通过反向转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)检测了克氏原螯虾各组织中C型凝集素mRNA的表达情况,发现其主要在肝脏、肠道和淋巴组织中表达较高。随后,我们利用Westernblotting技术检测表达得到的重组凝集素的纯度和免疫反应性。结果显示,表达获得的凝集素分子量约为25kDa,与预期大小相符。接着,我们对表达的凝集素进行了凝集活性测定。在不同浓度的Ca2+存在下,凝集素能够明显地促进细胞凝集。我们进一步发现,该凝集素的凝集活性与Ca2+浓度呈呈正相关。此外,我们还利用流式细胞术观察了该凝集素对单核细胞的影响,发现其能够显著地促进单核细胞与其他细胞的黏附与凝集。综合以上结果,我们初步得出结论:通过真核表达系统成功表达得到的克氏原螯虾C型凝集素具有明显的凝集活性,其表达模式与其生物学活性密切相关。这为我们今后深入探究该凝集素的生物学功能奠定了基础。
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