解脲支原体感染增强人子宫内膜上皮细胞株HSP70和RBM4表达的任务书一、选题背景与意义解脲支原体是常见的生殖道感染病原体之一，引起的雌性阴道炎、宫颈炎和尿道炎等疾病严重影响了女性的生殖健康。治疗解脲支原体感染的同时，提高宫内膜上皮细胞的免疫力和抗病能力也是非常重要的。热休克蛋白（Heatshockprotein，HSP）和RNA结合蛋白RBM4都是重要的细胞适应性蛋白，能够参与调节细胞的代谢和生理功能。本研究旨在探讨解脲支原体感染对宫内膜上皮细胞中HSP70和RBM4表达的影响，从而为治疗和预防女性生殖道感染提供新的理论依据。二、研究内容与方法1.研究内容（1）解脲支原体感染下宫内膜上皮细胞中HSP70和RBM4表达的变化；（2）HSP70和RBM4参与宫内膜上皮细胞免疫反应和细胞凋亡的机制研究。2.研究方法（1）建立宫内膜上皮细胞株。从人体器官中获取宫内膜上皮细胞，进行细胞分离和纯化，选取生长活跃的细胞株，建立宫内膜上皮细胞株。（2）解脲支原体感染模型的建立。采取细胞培养体系和细胞接种方法，建立解脲支原体感染的宫内膜上皮细胞模型，观察细胞形态、细胞增殖和细胞周期等情况。（3）实时荧光定量PCR法测定HSP70和RBM4mRNA的表达变化。从宫内膜上皮细胞株中提取总RNA，采用实时荧光定量PCR技术测定HSP70和RBM4mRNA水平的变化。（4）Westernblot法测定HSP70和RBM4蛋白的表达变化。采用Westernblot技术，测定HSP70和RBM4蛋白水平的变化。（5）细胞凋亡和免疫反应的检测。通过TUNEL实验和ELISA检测细胞凋亡率和细胞免疫反应。三、预期成果通过本研究，预期可以得到以下成果：（1）建立了人宫内膜上皮细胞株。（2）建立了解脲支原体感染的宫内膜上皮细胞模型。（3）探讨了解脲支原体感染对HSP70和RBM4表达的影响，发现解脲支原体感染可以显著促进HSP70和RBM4的表达。（4）探讨了HSP70和RBM4参与宫内膜上皮细胞免疫反应和细胞凋亡的机制，发现HSP70和RBM4可以显著抑制细胞凋亡，并促进细胞免疫反应。四、参考文献1.FazeliH,RamezanaliF,NasiriB,etal.(2016)MolecularDetectionofChlamydiatrachomatisInfectioninWomenWithInfertilityinIran.IntJFertilSteril,9(4):469-475.2.BukholmG,BukholmIR,JellumE(1998)Analysisofureaplasmaspresentduringestablishedinfectionsandattheendofpregnancyusingpolymerasechainreactionamplification.EurJClinMicrobiolInfectDis,17(10):696-701.3.ChienHY,LiaoCL,LinYL(2011)FUSEbindingprotein1interactswithuntranslatedregionsofJapaneseencephalitisvirusRNAandnegativelyregulatesviralreplication.JVirol,85(10):4698-4706.4.YangZQ,etal(2015)ExpressionandsignificanceofHsp70andTLR4inchickenembryosinfectedwithavianreovirus.ArchVirol,160(4):925-933.5.XuC,LiCY,KongAN(2005)InductionofPhaseI,IIandIIIdrugmetabolism/transportbyxenobiotics.ArchPharmRes,28(3):249-268.