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会计学取材前要问几个问题:a所要研究对象的解剖位置是否清楚?如海马….肾小球病变.b要观察样品的外部还是内部结构?_取材和固定前的处理(chǔlǐ)不同(TEM/SEM),如肠上皮、牙齿髓腔的观察...c是定量还是定性?d有横/纵向之分吗?肌肉﹑神经等2.取材(qǔcái)、固定3.各类标本(biāoběn)的取材培养(péiyǎng)细胞:量的多少能做(培养(péiyǎng)瓶\孔板);一般1mm3即可,12或24孔均可做TEM/SEM,其方法不同.SEM细胞可更少.二、超微结构观察(guānchá)与研究中值得注意的问题3.半薄切片:补充上述缺陷.生物样品的普通石蜡切片厚度为5微米左右,其观察深度远比超薄切片为大,即在石蜡切片和超薄切片之间不仅有观察范围大小的区别,也有观察厚度大小的显著差异.半薄切片厚度为1微米左右,一方面可为超薄切片定位,以选取电镜下观察部位,另一方面可供光镜观察标本的整体面貌.通过LM观察半薄切片可以检见通常在石蜡切片难以检见的形态结构,并据此可做出诊断.因为制作半薄切片的材料和技术操作过程不同于石蜡切片,而切片又较普通石蜡切片为薄,故其中某些(mǒuxiē)组织成分得以较好保存和得以显示,有利于诊断.4.电子显微镜的分辨本领虽已远胜于光学显微镜,但电镜因需在真空条件下工作,所以很难观察活的生物,而且电子束的照射也会使生物样品受到辐照损伤。其他的问题,如电子枪亮度和电子透镜质量的提高等问题也有待(yǒudài)继续研究。三、几类常见细胞的超微结构特征(tèzhēng)及鉴定如:分泌蛋白质的腺细胞富有粗面内质网和发达的高尔基复合体,巨噬细胞则有较多的溶酶体;构成肌组织的肌细胞,形态细长,含有大量纵行肌丝,是细胞收缩的物质基础;上皮组织则细胞排列紧密,具有吸收和保护等功能(gōngnéng)相关结构。又如消化管是连续的管道,而食管、胃、小肠和大肠的粘膜又各有特点,它们与各段的相应功能(gōngnéng)相关。因此,结构与功能(gōngnéng)相结合既能达到深入理解,融会贯通.1.神经元大鼠脑神经细胞,胞核大,核常染色质及染色质间颗粒(黑“↑”)明显(míngxiǎn),核仁大(白“▲”)。×14000大鼠脑神经细胞,胞质内粗面内质网(黑“↑”)丰富(fēngfù),高尔基体(黑“▲”)发达,细胞周边可见突触(白“↑”)。×20000人脑白质中少突胶质细胞,核及细胞均略呈椭圆形,核相对(xiāngduì)较大,胞质少,核糖体较多,其他细胞器少,邻近为神经毡。×160002.血管(xuèguǎn)内皮细胞内皮细胞超微结构的主要特点是胞质中有丰富的吞饮小泡,或称质膜小泡(plasmalemmalvesicle),直径60~70nm(图)。这些小泡是由细胞游离面或基底面的细胞膜内凹形成,然后与细胞膜脱离,经细胞质移向对面,又与细胞膜融合,将小泡内所含物质放出,故小泡有向血管内外输物质的作用,细胞质内还可见成束的微丝和一种外包单位膜的杆状细胞器,长约3μm直径0.1~0.3μm,内有6~26条直径约15nm左右的平行细管,称Weibel-Palade小体(W-P小体)W-P小体是内皮细胞特有的细胞器,一般认为(rènwéi)它是合成和储存与凝血有关的第Ⅷ因子相关抗原(factorⅧrelatedantigen,FⅧ)的结构(图)//3上皮细胞人皮肤鳞状上皮细胞,胞质内有丰富的张力(zhānglì)原纤维(白“↑”),细胞间有桥粒(黑“↑”)。×20000兔输卵管纤毛柱状上皮,可见纤毛柱状细胞(xìbāo)(黑“▲”)及浆液粘液分泌细胞(xìbāo)(白“▲”)。肠粘膜(zhānmó)上皮细胞间可见高脚杯状粘液分泌细胞(黑“↑”),核小(白“↑”),在基底处。×5000人胃粘膜上皮中神经内分泌细胞(xìbāo),胞质内可见大量神经内分泌颗粒,细胞(xìbāo)间可见桥粒(黑“↑”)。×60004.肌细胞免输卵管肌壁平滑肌细胞,胞质内可见密布肌细丝,少量(shǎoliàng)密体(黑“▲”)及密斑(黑“↑”),质膜外有基板,细胞间有连接。×30000细胞内可见(kějiàn)线粒体(黑“▲”)及肌原纤维,肌节(黑“↑”)中A带、I带、H带及Z线、M线都清楚可见(kějiàn)。X33000豚鼠(túnshǔ)心肌细胞,可见线粒体(黑“▲”)、肌原纤维(黑“↑”)、T管(白“↑”)及肌浆网(白“▲”)。×210005.肿瘤(zhǒngliú)细胞低分化(fēnhuà)鼻咽癌未分化型,癌细胞大小形状不一,仅见(jǐnjiàn)个别原始连接(黑“↑”)。×6000鼻咽癌,癌细胞大小不一,形态各异,胞质中可见较多粗面内质网及张力(zhānglì)原纤维(黑“↑”)。×10000间变型室管膜瘤,瘤细胞及核大小、形