临床检验基础实验六1.瑞氏染色1.1试剂成分：伊红——酸性——嗜碱性染料亚甲蓝（美蓝）——碱性——嗜酸性染料甲醇——固定溶剂磷酸缓冲液（pH:6.4-6.8）1.2着色原理：化学亲和作用+物理的吸附作用伊红+细胞中的碱性物质——红色亚甲蓝+酸性物质——蓝色中性物质+伊红和亚甲蓝——淡紫色1.3pH对细胞染色影响血涂片：淡紫红色镜下：成熟红细胞——粉红色白细胞——胞质呈现其特有的色彩细胞核紫红色染色质结构清楚染色偏酸:红细胞、嗜酸粒细胞颗粒偏红白细胞核淡紫红色或不着色染色偏碱：红细胞灰蓝色中性粒细胞颗粒深暗、偏粗，紫黑色嗜酸性粒细胞暗褐色或紫黑色、蓝色71.4器材载玻片、推玻片、洗耳球1.5试剂瑞氏染液（商品）I液：瑞特染料、纯甲醇、甘油I液：磷酸盐缓冲液（KH2PO4Na2HPO4）大家应该也有点累了，稍作休息1.6操作制备血涂片（待完全晾干）加I液数滴覆盖整个血膜0.5-1min滴加等量或稍多的II液（洗耳球混匀）5-10min冲洗（注意）干燥注意事项1.血涂片干后方可染色2.加染液不能过少3.冲洗时应以流水冲洗4.染色过淡可复染，先加缓冲液再加染液5.染色过深可用水冲洗或浸泡一定时间，也可用甲醇脱色6.染色时间与染液浓度、室温及细胞多少有关。应在具体实践中摸索合适的时间。2.WBC分类计数13-15μm圆形胞质着色不清胞质内颗粒粗大、整齐、均匀、充满胞质、桔红色核多分2叶染色质粗糙，紫红色10-12μm圆形胞质着色不清胞质内颗粒量少、大小不匀、排列零乱、紫黑色，可盖核上核形不清染色质粗糙，紫红色6-15μm圆形/椭圆形胞质透明、淡蓝色胞质内多无颗粒核形圆/椭圆/肾形染色质粗紧成块，深紫红色，核外缘光滑12-15μm圆/椭圆/不规则胞质半透明、灰蓝色或灰红色胞质内有细小、尘土样紫红色颗粒核形不规则/山字/肾/马碲形，扭曲折叠染色质疏松网状，淡紫红色，有膨胀感和立体起伏感2.5注意事项：1.分类最佳区域为体、尾交界处2.分类时要有秩序地连续进行3.白细胞总数与分类个数4.分类中如见幼红细胞，不计入100个细胞内，以分类100个白细胞过程中见到幼红细胞多少个来报告，并应注明其所属阶段。5.分类中应注意观察成熟红细胞、血小板的形态染色及其分布情况，注意有无寄生虫（如疟原虫）及其他异常所见。