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在ABO血型系统内,几乎所有缺乏抗原的人体,在其血清内必具有所缺乏抗原的抗体,若在红细胞上具有抗原时,则其血清内必缺乏对应的抗体,但这种规则偶然也有例外,血清中的抗体和细胞上的抗原不互补,正反定型相互不支持,出现血型难以确定。另外会遇到即使ABO和RH血型相同,但由于患者血清中存在意外抗体或红细胞上致敏有意外抗体及其它原因造成交叉配血不能相合。在ABO分型实验中,技术上的错误与各种临床情况或疾病,都能造成正反定型之间的矛盾,当预期的正反定型不能产生ABO抗原与抗体的互补结果时,首先需要排除在技术上可能发生的错误,如果细心而反复的实行对照试验产生相同形式的凝集反应,则需要考虑到细胞和血清的变异情况:(一)、实验者技术问题5.试剂受到污染6.温度在离心过程中增高7.忽略观察溶血现象8.细胞与血清间比例不适当,未发现弱凝集9.如果使用血清来悬浮细胞,血清中的高浓度血型物质中和了抗体试剂,使其不能再与红细胞抗原发生反应,出现了假的阴性反应10.在反定型试验时没有加血清,误认为是阴性结果;11结果判断错误(二)如何解决技术原因造成的正反定型不符ABO血型定型中由于细胞和血清本身的原因造成正反定型不一致绝大多数A和B型人红细胞用合格的抗-A和抗-B试剂检测都呈3十和4+的凝集强度,血清用合格的试剂红细胞检测绝大部分呈2+至4+的凝集强度。在A和B型红细胞凝集强度低于2+和1+的人中,有一部分是变异基因所致的亚型红细胞或者是疾病相关的抗原减弱。血清中的抗A或抗B凝集强度低于2+和1+的人中,是抗体减弱或缺乏。(1)这位病人的红细胞分型法与正常的强凝集反应相比,证明是减弱的反应,依据反定型法,应预期病人具有A抗原的活性。红细胞与抗AB的减弱凝集反应及抗A试剂缺乏凝集反应,都暗示为A型的亚型。(2)补充的实验室试验:吸收和放散试验证明红细胞附着有抗A。病人唾液含有A与H物质。(3)讨论:A亚型的问题要比B亚型者多而常见,因为A2或A2B型的人体血清中可能有抗A1抗体。比A2型为弱的A亚型不多见。若一位弱亚型病人错误地分型为O型而输予O型血液时,预期应无严重的后果。但若将一位弱亚型病人错误地分型而输给一位O型的病人时,则能引发严重的输血反应问题。1.A或B抗原的亚型2、疾病状态:减弱的A抗原表现也可病人后天的特性,如:A型急性白血病患者在疾病活动期改变为A2型或A3亚型,在疾病缓解期又恢复到原来A型反应。抗原性强度的减弱,也能发生于B抗原与H抗原以及其他血型系统的抗原。3、过量血型特异性可溶性物质:在患卵巢囊肿,胃癌或胰腺炎、肠道阻塞的稀有情况,能查见多量的血型特异性可溶性物质。病人血清中的ABH物质浓度极高,以抑制抗A或抗B试剂的作用,在正定型中,这种情形能产生假阴性,这种情况并非是病人的红细胞抗原发生改变,而是其血清含有过量的病人血清时,则能进行正确的ABO分型试验。二、未知的抗原反应1、获得性B抗原获得性B抗原的特性,获得性B只表现在A型红细胞上,使红细胞的反应像AB型,而血清中只有抗B抗体,正定型中反应的强度,A抗原大于B抗原,自身对照实验为阴性反应且分泌型人体内有A物质,但B物质则缺乏。当红细胞血型似乎是AB型而血清中含有抗B时,应该考虑是获得性B抗原.只有A型的红细胞能获得B活性,因此称为获得性B抗原,鉴别获得性B抗原的方法如下:1.观察细胞与抗A及抗B的凝集强度,与抗A的反应要比与抗B的反应强;2.用自身的红细胞检查本人的血清.其血清中的抗B不能凝集自身红细胞中的类B抗原;3.检查唾液是否存在A、B物质,如果病人是分泌型,那么有A物质而无B物质;4.获得性B抗原在正常PH介质中,红细胞与抗-B血清发生凝集,但在等于和低于PH6的酸性条件下,凝集消失,这是获得性B抗原最主要的血清学特征。5.核对病人的诊断。获得性B抗原的形成与结肠癌、直肠癌,革兰氏阴性细菌变形杆菌的感染有关。结论:病人为A型,具有获得性B抗原类B抗原具有下例特点1.类B与抗B的反应一般无溶血现象。类B是获得性的,不符合遗传规律,病情好转,类B就消失,真正B抗原符合遗传规律终生不变。2.类B与抗B结合疏松,用类B红细胞作吸收放散试验,可放散出大量抗B抗体,类B病人的唾液中不含B血型物质。3.因类B抗原而错定血型,其血清中天然抗体不合规律,如是AB型血清中应该不含天然抗B抗体。但A型类B表现似AB型,血清中却含有抗B抗体,此抗体并不凝集患者本人的红细胞,只要按正规操作,在血型鉴定中很容易发现被检者红细胞所含抗原与血清中所含抗体的矛盾。在AB型的交叉配血时,如发现主侧凝集,应考虑类B存在,重新鉴定血型并检查唾液中的血型物质,测出被检者真正的血型,最后选择同型人输血。4.类B与全凝集或多凝集红细胞不同,前者只与抗B反应,