《上海畜牧兽医通讯》２００６年第４期・５１・实验动物采血方法赵巧辉刘孟洲（甘肃农业大学７３００７０）实验研究中，经常要采集实验动物的血液进行常规检查表２常用实验动物的最大安全采血量与最小致死采血置或某些生物化学分析，故必须掌握血液的正确采集、分离和保存的操作技术。采血方法的选择，主要决定于实验的目的所需血量以及动物种类。凡用血量较少的检验如红、白细胞计数、血红蛋白的测定、血液涂片以及酶活性微量分析法等，可刺破组织取毛细血管的血。当需血量较多时可作静脉采血。静脉采血时，若需反复多次，应自远离心脏端开始，以免发生栓塞而影响整条静脉。例如，研究毒物对肺功能的影响、血液酸碱平衡、水盐代谢紊乱，需要比较动脉血氧分压、二氧化碳分压和血液ｐＨ值以及Ｋ、Ｎａ、Ｃ１一离子浓度，必采血时要注意：（１）采血场所有充足的光线，室温夏季最须采取动脉血液。好保持在２５－２８＂Ｃ，冬季１５－２０℃为宜；（２）采血用具有采用表１不同动物采血部位与采血量的关系部位一般需要进行消毒；（３）采血用的注射器和试管必须保持清洁干燥；（４）若需抗凝全血，在注射器或试管内需预先加入抗凝剂。现将采用血方法按动物和部位分别加以介绍，不同动物采血部位与采血量的关系可参考表１。常用实验动物的最大安全采血量与最小的致死采用血量见表２。ｌ小鼠、大鼠采血法１．１割（剪）尾采血：当所需血量很少时采用本法。固定动物并露出鼠尾。将尾部毛剪去后消毒，然后浸在４５℃左右的温水中数分钟，使尾部血管充盈。再将尾擦干，用锐器（刀或剪刀）割去尾尖０．３～０．５ａｎ，让血液自由滴人盛器或用血红蛋白吸管吸取，采血结束，伤口消毒并压迫止血。也可在尾部作一横切口，割破尾动脉或静脉，收集血液的方法同上。每鼠一般可采血１Ｏ余次以上，小鼠每次可取血０．１ｍｌ，大鼠０．３～０．５ｒｎｌ。１．２鼠尾刺血法：大鼠用血量不多时（仅做白细胞计数或血红蛋白检查），可采用本法。先将鼠尾用温水擦拭，再用酒精消毒和擦拭，使鼠尾充血。用７号或８号注射针头，刺人鼠尾静脉，拔出针头时即有血滴出。如果长期反复取血，＜＜＜＜＜＜＜＜＜＜＜＜＜＜＜＜＜＜＜＜＜＜＜＜＜＜＜＜＜＜＜＜＜＜＜＜＜＜＜＜＜＜＜＜＜＜＜＜＜＜＜＜＜＜＜＜＜＜＜＜＜＜＜＜＜＜＜＜＜＜＜＜＜＜＜＜＜＜＜＜＜＜＜＜＜＜＜＜＜＜＜＜犬病的一个经典的传统方法。尤其在不发达或偏远地区不牛肉和内脏等，对预防本病有重要的意义。具备实验条件时，可取２Ｏ％脑悬液的上清部分２ｍ１，注射于对犬目前还没有合适的疫苗可供使用，可试用”伪狂犬兔子的后腿肌肉内，注射后４８～９６ｈ，注射部位如出现剧烈病弱毒疫苗”对４月龄以上的犬肌内注射０．２ｎ１ｌ；大于１岁搔痒和自咬症，几个小时内家兔死亡，即可确诊为伪狂犬病。的犬为０．５ｍｌ，３周后再接种１次，剂量为１ｎ１ｌ。病料亦可接种小白鼠，但要脑内或鼻内接种，发痒症状可持如病已发生应将犬舍彻底打扫后用０．１％氢氧化钠溶液续１２ｈ，小白鼠不如兔敏感。等消毒液消毒，早期应用伪狂犬病高免血清或丙种免疫球蛋７．３聚合酶链式反应（ＰＣＲ）：该法是一种用酶催化进行目白治疗病犬，有较好的效果，如已出现神经症状，则效果不的基因体外扩增的方法。此技术形成于上世纪８０年代中后佳，各种抗生素及化学药品治疗均无效。期，不但广泛用于分子生物学研究，而且很快应用到了医学参考文献及兽医学的诊断上。该法具有很高的敏感性和特异性，而且［１］吴清民．兽医传染病学［Ｍ］．北京：中国农业大学出版所，２００２快速、简便，但该法要求一定的仪器和试剂，故Ｉ商床上较为少（２）殷震，刘景华．动物病毒学（Ｍ］．北京：科学出版社，１９９７．９８８～用，多在试验中应用。１００９［３］皇甫和平．猪伪狂犬病病毒豫Ａ株的分离、鉴定及ＰＫ基因的克此外，还可用直接免疫荧光、酶联免疫测定和琼脂扩散隆与序列分析．河南农业大学．２００４等实验进行诊断。［４］李雅玲，王伟利．实用犬病防治大全（Ｍ］．长春：延边人民池版社，８防治２００３，１７６１７９伪狂大病在犬类中主要通过吃入病死动物感染，因此，（５］王力光，董君艳，新编犬病临床指南（Ｍ］．长春：吉林科学技术出消灭犬舍中的老鼠，见到老鼠尸体要及时清除，禁喂病、死猪版社，２００１，２０４～２０６