StBCK1基因对玉米大斑病菌细胞壁发育及致病性的调控作用的任务书任务书题目：StBCK1基因对玉米大斑病菌细胞壁发育及致病性的调控作用背景概述：玉米大斑病菌是玉米重要的真菌病原体之一，其侵染玉米植株会导致叶片产生大斑点，甚至可以引起玉米枯死。因此，对于玉米大斑病菌的研究成为了农业领域的重点之一。研究表明，细胞壁扮演着菌菌相互作用和致病的重要角色。而蛋白激酶BCK1在细胞壁发育和逆境应答等生物过程中具有重要作用，本课题将探究StBCK1基因在玉米大斑病菌细胞壁发育和致病性调控中的作用，该研究有望为玉米大斑病菌的治疗提供新的思路。研究目的：1.获得StBCK1-knockout突变菌株。2.探究StBCK1基因对玉米大斑病菌的细胞壁发育的调控作用。3.探究StBCK1基因对玉米大斑病菌致病性的调控作用。研究内容：1.构建StBCK1基因敲除载体，并利用CRISPR/CAS9技术敲除玉米大斑病菌StBCK1基因。2.利用不同条件下的培养基，观察StBCK1-knockout突变菌株与野生型菌株的菌丝发育状况，并比较其细胞壁结构差异。3.通过酶联免疫吸附实验（ELISA）和荧光素酶检测等技术，探究StBCK1-knockout突变菌株致病性的变化。4.利用实时荧光定量PCR技术，研究StBCK1基因对其他与细胞壁相关基因表达的调控作用。研究方法：1.玉米大斑病菌菌株的培养和分离，基因敲除载体的构建和专一的目的基因敲除（CRISPR/CAS9技术）。2.放射免疫印迹分析法（RI）检测细胞壁网状素含量和多聚半乳糖醛酸含量，扫描电镜观察细胞壁结构的变化。3.ELISA，荧光素酶检测等技术。4.实时荧光定量PCR技术研究意义：本研究将有助于进一步明确StBCK1基因在玉米大斑病菌中的调控作用，特别是在细胞壁发育和致病性中的作用机制。同时，该研究结果还可能为开发针对玉米大斑病菌的治疗手段和疫苗提供理论依据。预期结果：1.成功构建StBCK1基因敲除载体，获得StBCK1-knockout突变菌株。2.探究StBCK1基因对玉米大斑病菌的细胞壁发育的调控作用，发现StBCK1基因参与了玉米大斑病菌的细胞壁的组成与结构。3.探究StBCK1基因对玉米大斑病菌致病性的调控作用，发现StBCK1基因是影响玉米大斑病菌致病性的关键基因之一。参考文献：1.Baines,A.J.,&Pinder,J.C.(2000).TheproteinkinasePak3positivelyregulatesRaf-1activitythroughphosphorylationofserine338.Nature,103107-3112.2.James,T.Y.etal.(2006).Reconstructingtheearlyevolutionoffungiusingasix-genephylogeny.Nature443,818-822.3.Jaffe,E.K.(2003).Catalyticmetalionsinenzymaticcatalysis:differencesinchemicalandphysicalpropertiesbetweenzincandmagnesiumsites.CoordinationChem.Rev.238-239,379-397.4.Parsons,A.B.etal.(2004).Integrationofchemical-geneticandgeneticinteractiondatalinksbioactivecompoundstocellulartargetpathways.Nat.Biotechnol.22,62-69.