SiRNA介导的UBE2C沉默对乳腺癌MCF-7细胞株的影响的开题报告背景乳腺癌是世界范围内女性中最常见的恶性肿瘤之一。虽然在治疗方面取得了一些进展，但乳腺癌的复发和治疗难度仍然存在。因此，寻找新的治疗方法和靶点非常必要。多种蛋白质参与了该疾病的发生和发展，其中UBC2C（ubiquitin-conjugatingenzymeE2C）在乳腺癌中高表达，与肿瘤的恶性程度和预后有关。RNA干扰（RNAinterference,RNAi）技术基于由RNA诱导的基因靶向沉默。RNAi被广泛应用于生物学研究中，包括对细胞、生理和疾病进行调控。在过去的几十年中，RNAi已被证明是一种有用的工具来研究基因功能，以及抑制癌细胞中某些基因的表达。因此，RNAi技术能够成为一种处理乳腺癌的潜在疗法。目的本研究的目的是通过使用RNAi技术来探讨UBE2C在乳腺癌细胞株（MCF-7）中的影响，以及确定在抑制UBE2C表达后是否会影响这些细胞的增殖和凋亡。方法1.细胞株培养MCF-7细胞株在37℃和5%CO2气体环境下培养至80%的细胞密度，使用1×PBS淋洗。2.沉默UBE2CmRNA在MCF-7细胞株中使用siRNA沉默UBE2CmRNA表达。使用Lipofectamine®RNAiMAX试剂将siRNA与基础培养基混合，滴于MCF-7细胞株上，培养24小时后进行下一步实验。3.WesternblottingWesternblotting用于检测UBE2C表达和实验中细胞的凋亡等进行分析，将MCF-7细胞株(对照组和实验组)收集后进行样本预处理，使用SDS-PAGE分离所得荧光素硫酸盐染色可以检测目标蛋白。4.细胞增殖实验使用CCK8实验测量细胞增殖率。取出MSC-7细胞株收集均匀细胞并做成细胞悬液，约10^4个细胞为一组，在不同时间进行增殖实验，使用CCK8物质加入，测量时间后测量吸光度。5.细胞凋亡实验使用流式细胞术测量细胞凋亡率。在CCK8实验的时候，同样使用MSC-7细胞培养悬液，约10^4个细胞为一组，根据具体实验要求在其中添加不同试剂，在不同时间点上进行实验。单倍体指不完全以RNA或DNA为主，而是指对溶液中的探测染料如5，6-羧芴-1，3,8三磺酸钠，Hoechst33342等可以结合，形成明显光谱分裂表现，这表示细胞正在进入凋亡阶段。结果研究表明，使用siRNA沉默UBE2CmRNA在MCF-7细胞株中显著表现出细胞增殖减缓和细胞凋亡率的增强，并且UBE2C的表达水平得到了下调。这证明了ibe2C的高表达是促进死亡的一个主要因素和影响MCF-7细胞株的增殖和凋亡。这发现拓展了我们对UBE2C在乳腺癌中的研究，使其成为一个潜在的治疗靶点。结论使用RNAi技术，我们探索了UBE2C的表达对乳腺癌细胞株MCF-7的影响。我们的实验结果表明，IBE2C的高表达对乳腺癌细胞的增殖和凋亡都有明显的影响。RNAi技术可以成为一种靶向抑制癌症和其他疾病的蛋白质表达的有效工具。本研究结果为制定治疗乳腺癌的新方法提供了重要的基础知识。