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第三节肠球菌属广泛分布在自然界,常栖居人、动物得肠道与女性生殖道,就是引起医院内感染得重要病原菌。分类:链球菌科,具有D群链球菌得D抗原,过去就是属于链球菌属得D群,但种系分类法用DNA杂交研究发现,证实粪肠球菌与屎肠球菌不同于链球菌属细菌,与链球菌同源程度低,所以现将其从链球菌属中划分出来,命名为肠球菌属。由16SrRNA序列分析与核酸杂交等,证实有19种肠球菌,分成5群,临床标本分离得多属于群2。临床意义:最多见于尿路感染,多与尿路器械操作、留置导尿、尿路结构异常有关,就是重要得医院感染病原菌。腹腔与盆腔创伤时肠球菌也就是常见细菌。肠球菌引起得菌血症常发生于有严重基础疾病得老年人、长期住院接受抗生素治疗得免疫功能低下得患者。近年来不断上升得肠球菌感染率与广泛使用抗生素出现得耐药性有关。微生物特性:G+球菌,单个、成双或短链状排列,琼脂平板上生长得细菌呈球杆状,液体培养基中呈卵圆形、链状排列。无芽胞与荚膜,个别菌种有稀疏鞭毛。兼性厌氧菌,最适温度35℃,大多数菌株在10℃与45℃均能生长。所有菌株在含6、5%NaCl肉汤中能生长,在40%胆汁培养基中能分解七叶苷。多数菌种具有吡咯烷酮芳基酰胺酶,能水解吡咯烷酮-β-萘基酰胺(PYR),氧化酶(-),触酶(-)但某些菌株触酶可出现弱(+)。当粪肠球菌培养于含血得培养基中,可合成细胞色素氧化酶或触酶或两者皆有。含D群链球菌D抗原。与链球菌得显著区别:能在高盐(6、5%NaCl)、高碱(pH9、6)、高胆汁(40%)培养基、10℃与45℃均能生长、对许多抗菌药物表现天然耐药微生物检查:检验程序:图6-3标本采集:血、尿、创伤标本等,标本1h内接种完毕。标本直接检查:G染色镜检分离培养与鉴定:BAP若标本中含G-杆菌,可用选择鉴别培养基:①叠氮胆汁七叶苷琼脂——可抑制G-菌生长,肠球菌分解七叶苷为黑色菌落;②哥伦比亚多黏菌素-萘啶酸琼脂(CAN)与苯乙基乙醇琼脂(PEA)。35℃、24h形成灰白色、不透明、表面光滑、直径0、5~1mm大小得圆形菌落,羊血平板上为α溶血或不溶血,粪肠球菌得某些菌株在马血、兔血平板上出现β溶血。☆细菌鉴定方法:1、与触酶(-)得兼性厌氧G+菌鉴别:生化反应、生长温度。见表6-5(与乳球菌属、链球菌属、明串珠菌属鉴别)2、肠球菌属内得菌种鉴定:肠球菌属种得鉴定有赖于对糖得代谢,根据对甘露醇、山梨醇与精氨酸得代谢分成5组。药物敏感性试验:药敏试验选择药物:A组、B组、C组、U组主要就是要警惕肠球菌得耐药性,分天然耐药与获得性耐药:天然耐药——耐药基因存在于染色体,对一般剂量或中剂量氨基糖苷类耐药与对万古霉素低度耐药。获得性耐药——表现为对氨基糖苷类高水平耐药与对万古霉素、肽可霉素高度耐药。近来获得性耐药菌株不断增多,要求临床实验室对肠球菌进行耐药监测。由于耐万古霉素肠球菌发生率增高,为早期检出耐药菌株,可使用含万古霉素琼脂筛选方法。耐万古霉素肠球菌(VRE)检测:30μg万古霉素纸片:抑菌圈直径≤14mm,或MIC≥32μg/ml•纸片扩散法、自动化仪器•NCCLS推荐琼脂筛选法:脑心浸液琼脂,加6μg/ml万古霉素,点种105~106CFU/点,35℃、24小时。•耐高水平氨基糖苷类肠球菌:根据耐药机制,肠球菌对庆大霉素耐药,则对除链霉素以外得其她氨基糖苷类均耐药,所以常规耐药性监测试验主要就是庆大霉素与链霉素得药敏试验。根据NCCLS标准,用MIC浓度分别为500ug/ml庆大霉素及2000ug/ml链霉素作琼脂稀释法/微量肉汤稀释法以及纸片扩散法,检测耐高水平氨基糖苷类肠球菌。称为高水平耐药试验(HLA)。检验结果分析与报告:对重症感染患者分离得肠球菌应鉴定到种由于医院内感染肠球菌呈上升趋势,在做流行病学调查时要进行分型,以便追踪传染源。