问号钩端螺旋体鞘噒酯酶类溶血素Sph2原核表达及诱导细胞凋亡活性研究的开题报告题目：问号钩端螺旋体鞘噒酯酶类溶血素Sph2原核表达及诱导细胞凋亡活性研究摘要：问号钩端螺旋体鞘噒酯酶类溶血素Sph2是一种广泛存在于特定细菌属中的膜结合蛋白，其N端有一段细菌素结构域，可对靶细胞进行极强的溶血作用。本研究致力于利用原核表达系统对Sph2进行表达，并探究其对细胞凋亡的诱导活性及作用机制。研究内容：1.Sph2原核表达系统的构建2.蛋白表达纯化及其生物学活性检测3.利用不同浓度的Sph2作用于细胞，通过CCK8法、流式细胞仪等方法测定Sph2对细胞增殖、细胞周期及生存率的影响情况4.利用DASPEI染色、AnnexinV/PI染色等方式对细胞进行凋亡检测，同时利用Westernblot检测凋亡相关蛋白及信号通路的变化情况预期结果：1.成功构建Sph2原核表达系统，获得纯化有效的重组蛋白2.Sph2能明显抑制多种细胞的生长及生存率，对某些细胞具有明显的诱导凋亡活性3.Sph2能抑制细胞周期的进展，特别是在S或G2/M期的细胞受到Sph2的诱导后凋亡的比例较高4.Sph2能够通过调节凋亡相关的蛋白及信号通路的表达水平，调节细胞凋亡的进程意义：本研究可以提供关于问号钩端螺旋体鞘噒酯酶类溶血素Sph2的生物学活性检测及作用机制的初步探究，为其在药物研发及其他替代清除微生物的应用领域提供借鉴。