巴马小型猪内源性反转录病毒的定量检测与细胞感染模型的构建的开题报告开题报告一、研究背景和意义巴马小型猪（Bamamini-pig）是一种常用的动物实验模型，因其小型化、秉性温顺、易于繁殖和长寿等特点而备受关注。近年来，随着科技的不断进步，越来越多的疾病模型被建立在Bamamini-pig上，如心血管疾病、神经系统疾病、睡眠障碍、消化系统疾病等，因此对Bamamini-pig的研究将会为各个领域的疾病模型研究提供有力支撑。然而，对于Bamamini-pig的病毒性疾病的研究比较缺乏，其中内源性反转录病毒（endogenousretrovirus,ERV）是被忽视的一类病毒。ERV是一种以细胞内病毒形式存在于动物和人类基因组中的DNA序列复制体，它们是由古老的病毒感染事件留下的遗迹。在Bamamini-pig中，ERV呈现出一定的活性，这可以在RNA-seq数据中发现，其中某些ERV甚至在Bamamini-pig中编码蛋白质。虽然内源性反转录病毒一般并不会对动物的健康造成影响，但是它们的活性会对疾病模型的研究造成影响。另外，ERV的存在也会产生误差，干扰病毒检测和基因表达等实验结果。因此对Bamamini-pig内源性反转录病毒的研究具有一定的意义。二、研究目标从脐带输注的Bamamini-pig中筛选出含有巴马小型猪内源性反转录病毒（BmERV）的细胞系，并构建BmERV的感染模型。通过建立相应的定量检测方法，并应用该检测方法检测Bamamini-pig组织样本中BmERV的水平。三、研究内容和步骤（一）筛选含有BmERV的细胞系在脐带输注的Bamamini-pig中筛选出含有BmERV的细胞系，获取该细胞系的基因序列信息，分析其结构和活性，研究该细胞系对BmERV的表达情况、对BmERV的复制和传播能力等情况。（二）构建BmERV的感染模型构建BmERV的感染模型，开展BmERV的感染动力学研究，观察BmERV在细胞中的复制和传播情况，并探究BmERV感染机制。（三）建立定量检测方法使用RT-qPCR等技术建立BmERV的定量检测方法，检测BmERV在Bamamini-pig组织样本中的水平。（四）应用定量检测方法应用所建立的BmERV定量检测方法，检测不同组织及不同年龄段的Bamamini-pig中BmERV的水平，研究BmERV在不同生长发育时期和不同组织中的表达和分布特点。四、研究预期成果（一）成功筛选出含有BmERV的细胞系，并获取其基因序列信息；（二）成功构建BmERV的感染模型，探究BmERV的感染机制和传播途径；（三）成功建立BmERV的定量检测方法，并应用该方法检测Bamamini-pig组织样本中BmERV的水平；（四）得到BmERV在不同年龄段和组织中的表达和分布特点，为Bamamini-pig疾病模型的研究提供基础数据。五、研究贡献（一）为Bamamini-pig疾病模型的研究提供有力支持；（二）为研究内源性反转录病毒的复制和传播机制研究提供新的实验材料和依据；（三）为研究内源性反转录病毒的诊断和治疗提供基础数据。