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(一)目的基因主要是___________________。1.基因文库:提取某种生物的全部DNA某种生物的单链mRNA文库类型1.概念:PCR全称为_________________,是一项在生物______复制______________的核酸合成技术。2.原料:四种脱氧核苷酸(dNTP)利用PCR技术扩增6.PCR过程PCR与DNA复制比较:1.目的:2.基因表达载体的组成:(一)转化:1、将目的基因导入植物细胞的方法:(1)农杆菌转化法①农杆菌特点:③过程:(2)基因枪法(3)花粉管通道法2、将目的基因导入动物细胞①方法:显微注射技术②程序:③常用的动物受体细胞:受精卵和卵细胞3、将目的基因导入微生物细胞①原核生物特点:繁殖快、单细胞、遗传物质少②方法:(二)方法四、目的基因的检测与鉴定2、检测目的基因是否转录出了mRNA(二)鉴定(个体生物学水平)人体细胞获取目的基因从基因文库中获取目的基因利用PCR技术扩增目的基因构建基因表达载体目的基因、启动子、终止子、标记基因将目的基因导入受体细胞植物、动物、微生物目的基因的检测与鉴定检测:分子水平是否插入、转录、翻译鉴定:个体水平基因工程的基本工具?限制酶的特点?DNA连接酶和载体的种类?基因工程的基本操作程序?获取目的基因的方法?基因工程的核心步骤是?基因表达载体的组成?将目的基因导入植物、动物、微生物细胞的方法?目的基因能否在受体细胞中稳定遗传的关键?目的基因的检测与鉴定的方法?一、植物基因工程硕果累累(一)抗虫转基因植物(二)抗病转基因植物(三)抗逆转基因植物(四)利用转基因改良植物的品质二、动物基因工程前景广阔3.用转基因的动物生产药物获取目的基因(例如血清蛋白基因)4.用转基因的动物作器官移植的供体三.基因工程药品异军突起作用:胰岛素是治疗糖尿病的特效药。传统生产方法:主要从猪、牛等家畜的胰腺中提取,每100kg胰腺只能提取4~5g胰岛素。产量低,价格昂贵。基因工程方法:1979年,科学家将动物体内的胰岛素基因与大肠杆菌DNA分子重组,并在大肠杆菌内实现了表达。1982年,美国一家基因公司用基因工程方法生产的胰岛素投入市场,售价降低了30%~50%。基因工程药品——干扰素基因工程药品——生长激素四、基因治疗曙光初照3)基因治疗的方法4)用于基因治疗的基因种类多聚半乳糖醛酸酶(PG)能降解果胶使细胞壁破损。成熟的番茄果实中,PG合成显著增加,能使果实变红变软,但不利于保鲜。利用基因工程减少PG基因的表达,可延长果实保质期。科学家将PG基因反向接到Ti质粒上,导入番茄细胞中,得到转基因番茄,具体操作流程如图。据图回答下列问题:(原生质体是去掉细胞壁的植物细胞)(1)若已获取PG的mRNA,可通过________获取PG基因。重组质粒转移到大肠杆菌中的目的是__________________________________________________________________。(2)用含目的基因的农杆菌感染番茄原生质体后,可用含有________的培养基进行筛选,理由是________________________。之后,还需将其置于质量分数为25%的蔗糖溶液中,观察细胞________现象来鉴别细胞壁是否再生。(3)由于导入的目的基因能转录出反义RNA,且能与________互补结合,因此可抑制PG基因表达的翻译过程。若______________,则可确定转基因番茄培育成功。知识回顾1例如:1与基因工程的关系:蛋白质工程流程图:蛋白质工程的主要步骤通常包括:文库类型利用PCR技术扩增③过程:2、将目的基因导入动物细胞①方法:显微注射技术②程序:③常用的动物受体细胞:受精卵和卵细胞四、目的基因的检测与鉴定(二)抗病转基因植物(四)利用转基因改良植物的品质