新型微管抑制剂6a对耐药肿瘤细胞KBV的生长抑制作用研究的任务书任务书研究背景：癌症是全球公认的一种重大威胁人类健康的疾病，肿瘤细胞的化疗耐药是治疗效果的重要限制因素之一。因此，研究新型抗肿瘤药物，对肿瘤的治疗具有重要意义。微管是肿瘤细胞分裂与迁移必不可少的组成部分。微管抑制物质能够极大地影响肿瘤细胞的生长以及侵袭能力。在抑制微管形成过程中，微管动力蛋白的作用是不可替代的，是微管抑制剂研究中的一个重点方向。研究目的：本研究的目的是通过试验研究新型微管抑制剂6a对耐药肿瘤细胞KBV的生长抑制作用及其机制，为开发新型抗肿瘤药物提供实验数据。研究内容：1.构建受试细胞：选择人肺癌细胞株KBV为研究对象，经过体外慢性处理后，耐受剂量较高的，具有明显化疗耐药性的KBV细胞系被培育出来，用于后续试验。2.细胞生长抑制及细胞周期：采用MTT法检测6a对KBV细胞生长的影响，同时探究其作用于细胞周期的分布情况，通过细胞的流式细胞术进行实验。3.检测微管成形：利用HEK293T细胞及生物荧光工艺构建全长的EGFP-p50表达载体，以此为模板分离出p50影响微管动力蛋白，将其转化为规范的蛋白体系，在此基础上探究6a抑制微管成形的作用机制。4.检测活性蛋白：利用免疫共沉淀技术检测6a在肿瘤细胞中对活性蛋白的表达是否产生影响，包括Akt、ERK、mTOR等。预期结果：本研究主要预期目标是实现对6a抑制耐药肿瘤细胞KBV的生长及微管成形的研究计划。具体预计研究结果是：1.成功构建KBV细胞系模型，验证该系与敏感细胞系的生长特点的不同。2.试验结果将证明6a可有效抑制肿瘤细胞生长，检验其治疗肿瘤的作用。3.实验说明6a能够诱导肿瘤细胞周期的分配发生变化，并消除癌细胞内的微管结构，进一步证实微管动力蛋白的重要性。4.探究6a对细胞内的活性蛋白进行干预的机制，以便更好地揭示药理学原理。研究意义：本研究旨在探索一种新型抗肿瘤药物的生长抑制机理，并提供一种新型低毒副作用的抗癌药物开发思路。对广泛存在的肿瘤治疗现状的突破能够帮助研究者更有效地掌握肿瘤的发病机理，促进医学领域的发展及进步。同时，本研究提高了我们对微管动力发展和耐药性的理解。可以为开发新型治疗耐药性肿瘤的药物提供实验数据，并为相关领域的发展开辟出新的方向。参考文献：[1]YankeYu,YueHu,WeiHuang,etal.PreclinicalCharacterizationofaNovelMicrotubuleInhibitorST64.MolecularCancerTherapeutics,2019.[2]SatoshiYamauchi,KyokoHonda,YujiMimura,etal.Microtubule-DisruptingAgentsEribulinandPaclitaxelDifferentiallyAffecttheAssemblyofClaudinTightJunctionsinHumanEpithelialCells.JournalofPhamaceuticalSciences,2018.[3]XiaowenHu,FelixNjimah,DanYao.RecentAdvancesinMicrotubule-basedLayeredDoubleHydroxideNanocompositesforAnticancerDrugDelivery.JournalofMaterialsChemistryB,2019.