Ad535 mCD20载体的构建及鉴定的中期报告.docx
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Ad535mCD20载体的构建及鉴定的中期报告该项目主要目的是构建一个AD535mCD20载体,并通过鉴定确认其在mCD20表达和细胞毒素释放方面的功能。一、构建AD535mCD20载体1、从MDA-MB-231细胞中扩增MDA-MB-231cDNA,并通过PCR方法插入AD535表达载体中。2、通过限制性酶切和测序鉴定构建的AD535mCD20载体。二、鉴定AD535mCD20载体的功能1、转染AD535mCD20载体进入HEK293T细胞,并通过Westernblot检测mCD20蛋白的表达水平。2、将转染的HEK293T细胞加入CD20阳性的Daudi细胞,通过MTS实验和细胞毒素释放实验来鉴定AD535mCD20载体在细胞毒素释放方面的功能。三、已完成实验进展:1、已成功扩增MDA-MB-231cDNA,并插入AD535表达载体中。2、通过限制性酶切和测序鉴定,确认构建出AD535mCD20载体。3、已成功转染HEK293T细胞,并通过Westernblot检测检测到mCD20蛋白的表达水平。四、下一步工作:1、继续优化转染条件,在Daudi细胞系中进行细胞毒素释放实验。2、进行进一步的数据分析和统计,以确定AD535mCD20载体的功能和效果。该中期报告显示,该团队已经完成了实验的一部分,确认了构建AD535mCD20载体的成功,并通过Westernblot检测到了mCD20蛋白的表达。下一步需要继续进行实验,以完成对该载体在细胞毒素释放方面功能的确认,并进行进一步的数据分析和统计。