HPV16E7c与人β防御素2融合基因表达质粒的构建、表达与免疫功能实验研究的开题报告研究背景与意义:人类乳头瘤病毒(HPV)感染是导致宫颈癌和其他妇科癌症的主要原因之一。感染HPV16和18型病毒株增加了罹患宫颈癌的风险，并且这两种病毒占所有宫颈癌的70％以上。因此，发展HPV16和18预防和治疗新策略至关重要。人β防御素2(DEFB2)是一种天然免疫反应分子，具有广谱抗病毒和抗肿瘤活性。因此，将HPV16E7c与DEFB2基因融合可能会提高病毒病和肿瘤的免疫保护作用。因此，本研究旨在构建HPV16E7c和DEFB2基因的融合质粒，并研究其免疫功能，以寻求一种新的HPV16相关疾病的预防和治疗策略。研究方法:1.利用PCR扩增HPV16E7c和DEFB2基因序列，并进行DNA连接。2.将E7c-DEFB2融合基因克隆到表达载体pUC57中。3.转化大肠杆菌DH5α菌株，并筛选获得重组融合质粒。4.提取重组质粒进行限制性酶切和测序验证。5.将重组质粒转染入HEK293T细胞，用Westernblot检测蛋白表达。6.合成E7c、DEFB2和E7c-DEFB2的多肽，用于实验分析多肽的免疫反应。预期结果和意义:预计成功构建HPV16E7c和DEFB2基因的融合质粒，并在HEK293T细胞中成功表达融合蛋白。使用合成的多肽对小鼠进行免疫，并通过检测小鼠的免疫反应来评价E7c-DEFB2多肽的免疫效果。如果本研究成功，本研究将提供一种新的HPV16相关疾病预防和治疗策略。