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会计学绿色植物中色素(sèsù)的提取和分离一、实验(shíyàn)目的二、实验(shíyàn)原理叶绿素a(R=CH3)叶绿素b(R=CHO)吸附色谱是以氧化铝、硅胶等为吸附剂,将一些物质从溶液中吸附到它的表面上;然后用溶剂洗脱或展开,利用不同物质在吸附剂和溶剂之间分布情况不同而得到分开。如柱色谱和薄层色谱。分配色谱是利用混合物的组分在2种互不相溶的液体中分布情况不同而得到分离。这样的分离不经过吸附程序,仅由溶剂的萃取(cuìqǔ)来完成,相当于一种连续性溶剂萃取(cuìqǔ)方法。薄层(báocénꞬ)色谱吸附剂薄层色谱中常用的吸附剂是硅胶和氧化铝。其中(qízhōng)硅胶分为硅胶G(含有煅石膏粘合剂)、硅胶H(不含粘合剂)、硅胶HF254(含荧光物质)。氧化铝也根据含粘合剂或荧光物质分为氧化铝G、氧化铝GF254、氧化铝HF254。1:薄层板为什么要活化?2:在混合物的薄层色谱中,如何定性的判定(pàndìng)各组分在薄层上的位置。Rf值(比迁移值)比迁移值是表示色谱图上斑点相对位置的一个数值。各种物质的Rf值因其结构、吸附剂种类、展开剂、温度等不同而异。当上述(shàngshù)条件固定时,对于一个物质来说比迁移值(Rf值)是一个特性常数,可以用来鉴别不同化合物,还可用于物质的分离和定量测定。柱色谱是通过色谱柱来实现分离的。在色谱柱内装有固体吸附剂(固定相)如氧化铝或硅胶。液体样品从柱顶加入,当液体流经吸附剂时,由于吸附剂表面对液体中各组分吸附能力不同而按一定的顺序吸附。然后从柱顶加入洗脱剂(流动相),样品中的各组分随洗脱剂按一定的顺序从色谱柱下端流出,根据不同颜色分段收集。如为无色(wúsè)物质,可用紫外光照射,收集会发出荧光的组分;否则就要采取分段收集洗提液,再分别进行鉴定。柱色谱(sèpǔ)原理:吸附剂常用吸附剂有氧化铝、硅胶、氧化镁等。吸附剂对化合物的吸附能力与分子的极性有关,极性越强,吸附能力越大,分子中含有(hányǒu)极性较大的基团,其吸附能力也越强。溶剂溶剂分为溶解样品的溶剂和洗脱剂。选择溶剂时还要考虑到被分离物各组分的极性和溶解度。通常(tōngcháng)是先将要分离的样品溶于非极性溶剂中,从柱顶加入柱中。然后用稍大极性的溶剂使各组分在柱中形成若干谱带。再用极性更大的溶剂洗脱被吸附的物质。为了提高洗脱效果,有时也使用混合溶剂。三、试剂(shìjì)及仪器四、实验(shíyàn)步骤四、实验(shíyàn)步骤四、实验(shíyàn)步骤各洗脱(xǐtuō)剂对应的色带五、注意事项内容(nèiróng)总结