当归对宫内缺氧新生大鼠神经干细胞增殖的影响【摘要】目的探讨宫内缺氧对新生大鼠神经干细胞增殖的影响及当归注射液的保护作用。方法将孕期14d的SD大鼠随机分为对照组、缺氧组和当归治疗组。缺氧组孕鼠自孕第14天开始每天一次经尾静脉注射生理盐水8ml/kg，后用低张性缺氧模型致胚鼠宫内缺氧2h；当归治疗组用250g/L的当归注射液代替生理盐水，其余处理同缺氧组；对照组不缺氧，其余同缺氧组。孕鼠分娩后立即取新生鼠大脑组织，常规石蜡切片，经巢蛋白免疫组织化学染色后行图像分析。结果缺氧组新生鼠海马巢蛋白免疫组化阳性细胞的积分光密度值较对照组增加［IOD缺氧组：；IOD对照组：，P＜］；当归治疗组新生鼠海马巢蛋白免疫组化阳性细胞的IOD值较缺氧组减弱［IOD治疗组：，P＜］。结论一定程度的缺氧可刺激神经干细胞增殖；当归注射液对宫内缺氧新生大鼠神经干细胞可能具有保护作用。【关键词】当归缺氧神经干细胞增殖Abstract:ObjectiveTostudytheeffectofintrauterinhypoxiaontheproliferationofneuralstemcells(NSCs)fromnewbornratsandtheprotectiveroleofAngelicainjectiononNSCsinastateofd-conceivingfemaleSDratsweredividedrandomlyintothreegroups:controlgroup(CG),hypoxiagroup(HG)andAngelicagroup(AG)withfiveratsineachthefourteenthdayofpregnanttheratsofHGwereinjectedwithNormalSalinethroughcaudalveins(within7straightdays;8ml/)beforeintrauterinhypotonichypoxia(within3straightdays;onthefourteenth,fifteenthandsixteenthdayafterpregnancy;2hourseveryday).AngelicasinensisinjectioninsteadofNormalSalinewasinjectedintotheratsintheAG,andotherprocedureswerethesameastheadministrationofhypoxiawasperformedinthebraintissuesofnewbomrutswerehamestedimmediatelyofnewbornratsafterexpressionofnestininthehippocampusofnewbornratswasstudiedwithimmunohistochemistryandtheresultswereanalyzedbyimageprocessingofnestinpositivecellsinHGwashigherthanthatoftheCG(IODHG：14806±；IODCG：7387±,P＜)；butinAG,itwaslowerthanthatofHG.ConclusionHypoxiacanstimulatetheproliferationoftheNSCsAngelicainjectioncanplayaprotectiveroleonNSCsfromnewbornratswithintrauterinhypoxia.Keywords:Angelica；Hypoxia；Stemcell；Proliferation宫内缺氧是胚胎发育中的常见症，是造成脑瘫、癫痫及智力发育迟缓或智力低下的重要原因，神经系统是胚胎发育中出现最早的系统之一，因此研究宫内缺氧对神经干细胞的影响具有重要意义。目前国内外神经干细胞增殖的研究多是在体外状态下进行的，在体的研究大多集中在对生后7～14d的新生鼠夹闭颈总动脉，给予低氧干预。本实验试图通过建立宫内缺氧模型，观察在体状态下缺氧对新生大鼠神经干细胞增殖的影响，并观察中药当归对缺氧状态的调节，为临床长期观察宫内缺氧对新生鼠的影响和治疗宫内缺氧提供实验和理论依据。1材料与方法1材料nestin单克隆一抗购自、SABC试剂盒、DAB显色试剂盒(棕黄色)购自武汉博士德生物工程公司；250g/L的当归注射液购自武汉大学附属第二医院药剂科；OLYMPUSBx-70荧光显微镜成像系统为日本OLYMPUS光学仪器有限公司生产；德国莱卡切片机；三气培养箱，SD大鼠15只由四川泸州医学院动物科提供。2动物配种与分组将成年发情期SD雌大鼠15只分别与一只雄鼠合笼饲养，次日