麻黄水提液体外抗RSV实验研究的开题报告一、研究背景呼吸道合胞病毒（RSV）是一种主要引起儿童急性下呼吸道感染的病原体。病毒感染后会引起喉炎、支气管炎、肺炎等呼吸系统疾病。目前没有针对RSV的特异性治疗方法，预防和对症治疗是目前主要手段。研究发现，麻黄中的麻黄碱等生物活性物质具有抗病毒活性，因此探究麻黄水提液对RSV的抗病毒作用，对RSV的治疗具有重要意义。二、研究目的本研究旨在探究麻黄水提液在体外对RSV的抗病毒作用，为寻求RSV治疗新思路提供基础研究支持。三、研究内容1、提取麻黄水提液取麻黄50克，加水1000ml，加热至90℃，煮沸后维持90℃水浴2小时，冷却澄清，滤过，蒸发至常压下比容为0.5g/mL的麻黄水提液。2、检测麻黄水提液的生物活性物质含量通过高效液相色谱法检测提取的麻黄水提液中麻黄碱、伪麻黄碱、苯丙氨酸、酪氨酸的含量。3、体外抗RSV实验3.1肺细胞株的选择与培养选择Vero细胞株进行培养，以DMEM培养基为基础，加入10%热灭FBS，然后加入1%的L-谷氨酸，调整至PH为7.2-7.4。3.2细胞准备与操作将Vero细胞接种于96孔板中，每个孔内含有1×10^4/mlVero细胞，细胞密度达到80%后，加入不同浓度的麻黄水提液，并采用未加入麻黄水提液的Vero细胞为对照组，培养24小时后，取出细胞，计算感染率，同时测定细胞增殖率。3.3RSV感染与TCID50法检测将已感染RSV的Vero细胞通过离心法分离，抽提病毒液，检测TCID50值。3.4抗RSV作用的评价分别将不同浓度的麻黄水提液作用于已感染RSV的细胞，通过TCID50实验，计算病毒复制率和抑制率，分析麻黄水提液的抗RSV作用。四、预期结果本研究将确定麻黄水提液中生物活性物质含量，探究麻黄水提液对RSV的抗病毒作用，在体外研究中评价该水提液的抑制效果。五、结论本研究预期将揭示麻黄水提液对RSV的抗病毒作用和抑制效果，为开发和研制抗RSV新药提供理论基础支持。