两种真核微藻类胡萝卜素代谢工程的初步研究的中期报告本研究旨在探索两种真核微藻类（分别为Chlorellavulgaris和Nannochloropsisoculata）的胡萝卜素代谢工程。初步实验结果如下：1.构建胡萝卜素代谢途径基因表达载体针对两种微藻，根据已知的胡萝卜素代谢途径基因，选取相关基因并进行合成，然后将其构建成基因表达载体（以pCAMBIA1300-35S为骨架），以便在后续实验中用于基因转化。2.转化C.vulgaris和N.oculata将构建好的载体分别转化进C.vulgaris和N.oculata中，得到了两种真核微藻的转化菌株。通过PCR验证，表明目标基因已成功整合进微藻基因组中。3.胡萝卜素含量检测在获得转化菌株后，我们使用高效液相色谱法对两种真核微藻的胡萝卜素含量进行检测。结果显示，在转化菌株中，C.vulgaris的β-胡萝卜素含量得到了显著提高，而N.oculata的胡萝卜素含量则没有明显变化。4.对胡萝卜素合成途径基因的进一步优化考虑到N.oculata的胡萝卜素含量没有明显提高，我们进一步优化了该菌株的胡萝卜素合成途径基因表达。具体措施包括了：测序分析菌株胡萝卜素代谢通路中缺失的基因；通过PCR将这些基因合成并构建成新的基因表达载体；将新的载体分别转化至C.vulgaris和N.oculata中；使用高效液相色谱法检测胡萝卜素含量。目前这个实验正在进行当中。综合以上实验结果，我们初步可以得出结论：在两种真核微藻中进行胡萝卜素代谢工程是可行的，C.vulgaris对该工程的响应较好，而N.oculata则需要进一步的优化。