microRNA-107在胶质瘤和胶质瘤干细胞中的生物学功能研究的开题报告.docx
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microRNA-107在胶质瘤和胶质瘤干细胞中的生物学功能研究的开题报告背景和研究意义:胶质瘤是一类恶性脑肿瘤,其治疗效果一直不够理想,导致患者的生存率不高。因此,对于胶质瘤的研究十分重要,有望改善其治疗效果,提高患者的生存率。近年来,越来越多的研究表明,microRNA(miRNA)在胶质瘤的发生和发展中发挥了非常关键的作用。miRNA-107是一种高度保守的miRNA,在多种癌症中都有表达。现已证实miRNA-107与神经元发生和发展有关,同时研究还表明miRNA-107在多种肿瘤中也有作用,对肿瘤细胞的增殖、移动和凋亡等方面都有影响。这启示我们miRNA-107可能也在胶质瘤中发挥了作用。本研究旨在探究miRNA-107在胶质瘤中的表达水平及其对胶质瘤及胶质瘤干细胞生物学行为的影响,从而深入研究miRNA-107在胶质瘤的发生和发展中的作用机制,也有望为胶质瘤的治疗提供更为详细的理论指导。研究内容和方法:1.制备胶质瘤组织样本和胶质瘤干细胞收集20例胶质瘤患者的组织样本,同时分离出胶质瘤干细胞。对于胶质瘤组织样本,用实时定量PCR(qRT-PCR)法检测其中miRNA-107的表达水平,同时采用免疫组化法检测其在组织中的定位;对于胶质瘤干细胞,利用表面标志物CD133进行分离和纯化,之后检测miRNA-107的表达水平。2.miRNA-107对胶质瘤和胶质瘤干细胞的影响a.细胞增殖实验将胶质瘤和胶质瘤干细胞分别分组(miRNA-107表达组和对照组),测定细胞增殖率以及细胞周期分布,观察miRNA-107是否能影响瘤细胞增殖及增殖后代的周期静态状态。b.细胞凋亡实验分别将胶质瘤和胶质瘤干细胞分组(miRNA-107表达组和对照组),测定细胞的凋亡率和细胞周期分布,观察miRNA-107是否影响瘤细胞凋亡。c.迁移实验用Transwell小室检测胶质瘤和胶质瘤干细胞在miRNA-107表达与否下的迁移能力。d.实时荧光定量PCR法检测miRNA-107的靶基因通过miRNA-107的靶标,利用细胞实验,检测miRNA-107对于胶质瘤和胶质瘤干细胞的影响。同时运用实时荧光定量PCR法检测miRNA-107的靶基因,研究miRNA-107对这些靶基因的调控作用。预期结果:通过以上实验,我们期望可以得到胶质瘤和胶质瘤干细胞中miRNA-107的表达水平;同时我们也期望能够证明miRNA-107能够对胶质瘤和干细胞的生物学行为产生影响,如通过细胞增殖速度的实验,观察miRNA-107是否能抑制瘤细胞增殖;观察细胞的凋亡实验,检测miRNA-107是否能促进瘤细胞凋亡等;同时我们也期望能够验证miRNA-107是否通过对于靶基因的调控实现了对胶质瘤和胶质瘤干细胞的影响。通过这些实验结果,我们将对miRNA-107在胶质瘤中的作用有更为深入的理解,为下一步的研究提供指导。
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