TGEVS基因、N基因双顺反子DNA疫苗的构建研究的中期报告该报告的中期研究旨在构建一种TGEVS基因和N基因双顺反子DNA疫苗，对疫苗的基因克隆、表达和免疫原性评价进行探究。在基因克隆方面，我们使用PCR法从TGEV病毒中扩增出S基因和N基因的全长序列，并进行了正确性验证。然后，将S基因和N基因分别克隆到双顺反子pVAX1载体上。经酶切和测序鉴定后，成功构建出S基因和N基因双顺反子DNA疫苗构建体。在表达检测方面，我们将双顺反子DNA疫苗构建体转染到HEK293T细胞中，经RT-PCR、Westernblot和免疫荧光检测表明，S和N基因在细胞中得到了很好的表达。在免疫原性评价方面，我们将疫苗分别注射到小鼠体内，检测小鼠血清中的特异性抗体水平。结果表明，免疫小鼠的血清中均出现了明显的S和N基因的特异性抗体，说明该双顺反子DNA疫苗具有较好的免疫原性。总体来说，我们成功构建出了TGEVS基因和N基因双顺反子DNA疫苗，并进行了初步的免疫原性评价。概括中期研究结果如下：1.成功构建出S基因和N基因双顺反子DNA疫苗构建体。2.S和N基因在HEK293T细胞中得到了很好的表达。3.免疫小鼠的血清中均出现了明显的S和N基因的特异性抗体。随后将继续深入研究该疫苗的安全性和保护效果。