生化检测原理所以：待测物浓度可以由检测其颜色深浅得到。分光光度法的原理基础：Lambert-BeerLawLambert-BeerLaw的适用范围：为什么需要平行单色光？为什么仅适用一定范围内？前分光模式后分光模式双波长模式分光光度法的分析类型1PointEnd：仅检测反应终点的吸光度2-pointendassay:检测2个点的吸光度，一点反应启动前样品空白的吸光度，另一点为反应启动后的吸光度。2-PointEndAssay反应图：2-PointRateAssay：检测两个不同时间点之间的吸光度之差，除以时间差得到的变化率2-pointRateassay反应图1个或多个反应试剂通过最小二乘法计算反应曲线，得到待测物的量或活性RateA反应图：检测方法光度分析校准及报警Calibrationqualitycriteria校准限制界面校准报告CHOSDLimit(标准差限制):常见校准校准失败的原因Duplicatelimit:重复性限制Sensitivitylimit(灵敏度限制)Sensitivitylimit(灵敏度限制):常见校准校准失败的原因校准失败校准报警常见报警类型校准报警生化项目检测常用显色指示系统1，NAD+－NADH（NADP+－NADPH）指示系统：反应原理：NADH和NADPH在340nm有特征性吸收峰，而NAD+和NADP+在340nm无特征性吸收峰，利用其偶联的脱氢酶(工具酶)反应，根据340nm吸光度的变化，可以测定物质的浓度或活性。临床项目：ALT、AST、CK、LDH、CK-MB、α-HBDH、Glu（己糖激酶法）、UREA、NH4+、CO2等1.5.2.2.举例说明ALT的测定原理（IFCC）试剂成分和反应公式：R1：NADH、乳酸脱氢酶（LDH）；R2：L-丙氨酸、α-酮戊二酸。原理：NADH的减少，引起340nm吸光度的下降，下降速率与ALT活性成正比(酶动力学法)。2，p-NP（磷酸对硝基苯酚）和p-NA（硝基苯酚）指示系统反应原理：p-NP和p-NA在405nm有特征性吸收峰，根据405nm吸光度的变化，可以测定物质的浓度或活。临床项目：ALP、ACP、r-GT、AMY等。举例说明：ALP的测定原理（IFCC）试剂成分和反应公式。R1：AMP缓冲液，镁离子，锌离子，PH＝10.44；R2：对硝基苯磷酸，防腐剂，PH＝8.5原理：在镁离子和锌离子的存在下，碱性磷酸酶解离对硝基苯磷酸形成磷酸盐和对硝基苯酚，引起405nm吸光度的上升，上升速率与ALP活性成正比（动力学法）。3，H2O2偶联的指示系统反应原理：H2O2在过氧化物酶的作用下，可使单一个或成对的无色的色素原氧化成有色的色素，导致某一波长吸光度的增加，因此可用来测定物质的浓度或活性。临床项目：过氧化物酶法CHOL，GLU举例说明:GLU过氧化物酶法的测定原理R1：4-氨基安替吡啉、抗坏血酸氧化酶R2：葡萄糖氧化酶（GOD）、过氧化物酶（POD）、酚。测定原理：醌亚胺的生成，导致500nm吸光度的增加，增加的程度与Glu的含量成正比。4，抗原抗体反应指示系统，免疫比浊法反应原理：特异性抗体与抗原(待测物质)在相应的缓冲环境下反应生成抗原抗体复合物，形成一定的浊度，导致特定波长透光率的改变。在抗体过剩的前提下，改变程度与抗原浓度成正比。临床项目：apoAI、apoB、Lp(a)、IgG、IgA、IgM、C3、C4、CRP等。5，其它显色反应TP的反应原理：蛋白质中的肽键在碱性溶液中能与铜离子作用产生紫红色络合物，导致540nm吸光度的增加，增加的程度与蛋白质的含量成正比。ALB的反应原理：在pH4.2环境中，溴甲酚绿在有非离子去垢剂聚氧乙烯月桂存在时，可与白蛋白形成蓝绿色复合物，导致630nm吸光度的增加，增加的程度与白蛋白的含量成正比。其它的显色反应还有Ca和Mg等物质的测量方法，光度测定分析的流程14池冲洗单元位于反应盘右侧与后部。吸光度测定后，池冲洗单元进行反应池清洁、冲洗与干燥处理。为确保反应池的光路性能良好，清洁过程中进行水充盈反应池的吸光度测定（池空白）并与前期的测定结果进行比较。池空白值可确保反应池的所有条件处于小的可耐受范围内。如果反应池未达到这些预设定限度，则无法用于常规检测中。