细胞死亡医实医检口腔概述细胞凋亡Apoptosis细胞凋亡概念得形成细胞凋亡概念得形成细胞凋亡得概念一、细胞凋亡得形态学特征一、细胞凋亡得形态学特征一、细胞凋亡得形态学特征细胞坏死得形态学特征12细胞凋亡细胞坏死1、单个细胞丢失细胞成群丢失2、细胞膜发泡但仍完整细胞膜不完整3、细胞膜内陷将细胞细胞肿胀、溶解分割成凋亡小体4、不发生炎症反应发生严重炎症反应5、被邻近正常细胞被巨噬细胞所吞噬或吞噬细胞所吞噬6、溶酶体完整溶酶体裂解7、染色质均一凝集染色质聚集成块、不均一A坏死细胞3、SEMofanecroticcell、Numerouslesionsappearonthecellsurface、二、细胞凋亡得生物化学特征三、细胞凋亡得关键调控分子三、细胞凋亡得关键调控分子三、细胞凋亡得关键调控分子caspase家族哺乳动物中15种同源分子,其中7种参与细胞凋亡过程。根据其激活方式及在细胞凋亡信号传递中得作用,分为:凋亡起始酶(initiatorcaspase):caspase家族caspase家族caspase得活化同源活化(homo-activation)/自身活化(self-activation):起始酶(initiators)得活化起始酶含有较长得原结构域,对其活性有抑制作用通过DED、CARD结构域与其她蛋白质相互作用形成二聚体/寡聚体而恢复酶活性caspase得活化异源活化(hetero-activation):活化得起始酶催化水解效应酶将凋亡信号级联放大caspasecascadecaspase得效应机制caspase得效应机制caspase得效应机制caspase得效应机制Bcl-2(Bcellleukemia2)就是一种原癌基因;定位于线粒体外膜,可与胞质蛋白或同时锚定在线粒体外膜得该家族得其她蛋白相互作用;促进细胞存活(survival),抑制细胞凋亡,而不就是促进细胞增殖(proliferation)。所有Bcl-2家族成员均含有1～4个保守得BCL-2同源结构域(BCL-2homologue,BH),称为BH1～BH4。根据对细胞凋亡调节功能得不同,将Bcl-2家族成员分为两类:抗凋亡得负调节因子;促进细胞凋亡得正调节因子Bcl-2家族得分类,TaitandGreen,2010Bcl-2亚家族:Bcl-2、Bcl-xl、Bcl-w、Mcl-1、A1,具有BH1、BH2、BH3和BH4四个结构域。定位于线粒体外膜,抑制细胞凋亡Bax亚家族:Bax、Bak、Bok,具有BH1、BH2、BH3三个结构域,促进细胞凋亡得效应分子。需转位到线粒体外膜BH3亚家族:Bad、Bid、Bik、Blk、Hrk、BNIP3、Biml,仅有BH3结构域,通过与抗凋亡得核心分子结合,而释放BAX、BAK等,从而促进细胞凋亡四、细胞凋亡得信号通路死亡受体(DeathReceptor)死亡受体(DeathReceptor)Fas介导得细胞凋亡信号传递途径死亡诱导信号复合体(DISC)HIV介导得细胞凋亡2、细胞凋亡得内在途径(intrinsicpathway)/线粒体通路/应激通路射线、化学物质等造成DNA损伤,氧化应激、内质网未折叠蛋白累积等应激因素,通过调控Bcl-2家族得凋亡调节蛋白,导致线粒体膜通透化,使线粒体释放一些细胞凋亡相关分子,并启动细胞凋亡得级联反应,引发细胞凋亡过程。BAX、BAK得活化就是线粒体膜通透化得关键,BH3亚家族蛋白被诱导表达或激活后,可与BCL-2家族得抗凋亡核心蛋白质结合,从而解放出BAX、BAK,或者通过直接作用于BAX、BAK,调控其活化,使其寡聚化,形成蛋白质孔道,引起线粒体膜通透化,促进细胞色素Ｃ(CytC)得释放,激活caspasecascade,促进凋亡。细胞凋亡得内在途径细胞凋亡得内在途径细胞凋亡得内在途径细胞凋亡得内在途径五、凋亡细胞得检测五、凋亡细胞得检测五、凋亡细胞得检测Ca+FITC-Annexin-V-Fluorescence五、凋亡细胞得检测五、凋亡细胞得检测caspase活性得检测六、细胞凋亡得生物学意义个体发育过程中,清除机体内不需要得结构六、细胞凋亡得生物学意义六、细胞凋亡得生物学意义六、细胞凋亡得生物学意义六、细胞凋亡得生物学意义六、细胞凋亡得生物学意义细胞自噬与死亡Autophagy&AutophagiccelldeathAutophagy自噬Autophagy自噬