PAMAM-eIF4E-shRNA纳米微粒对人肝癌细胞抑制作用实验研究的任务书任务书研究背景:肝癌是全球最常见的癌症之一，也是致死率最高的癌症之一，其发生机制还未完全理解。存在着许多治疗肝癌的方法，但是很多治疗方法的效果并不理想。当今使用的化学治疗药物有效性较弱，常引起严重的副作用，如头发脱落、恶心、呕吐等等。因此，是研究一种更为安全和有效的治疗肝癌的方法变得更为重要。近年来，一种新型的纳米载体——PAMAM（Polyamidoamine）被广泛应用于抗肿瘤药物的传递。PAMAM有着优良的结构、良好的稳定性和可调控性，使其被大量研究用于肝癌的治疗。eIF4E是调节mRNA翻译的重要因子，它在多种癌症中的表达水平都有增加。过多的eIF4E可通过转录和翻译水平的增加促进肿瘤的生长和扩散。抑制eIF4E的表达对于肿瘤治疗有着重要的意义。shRNA是一种RNA分子，可以通过靶向RNA干扰技术来特异性抑制特定的基因表达。抑制eIF4E的shRNA可以在治疗肝癌的过程中发挥重要作用。本研究旨在设计和构建一种PAMAM-eIF4E-shRNA纳米微粒，并探讨其对于人肝癌细胞的抑制作用。研究内容：1.构建PAMAM-eIF4E-shRNA纳米微粒(1)根据已知的文献和资料，选择合适的PAMAM和shRNA，设计PAMAM-eIF4E-shRNA的构建方案;(2)构建PAMAM-eIF4E-shRNA纳米微粒;(3)通过凝胶电泳和紫外光谱等方法鉴定纳米微粒的构建效果。2.对PAMAM-eIF4E-shRNA纳米微粒进行体外和体内试验(1)检测纳米微粒的稳定性和兼容性;(2)通过MTT法等实验方法，检测PAMAM-eIF4E-shRNA纳米微粒对人肝癌细胞的抑制作用;(3)通过荧光染色等方法，观察PAMAM-eIF4E-shRNA纳米微粒进入细胞以及对eIF4E的抑制作用。3.分析PAMAM-eIF4E-shRNA纳米微粒的治疗机制(1)检测纳米微粒的对肝癌细胞生长和凋亡的影响;(2)检测纳米微粒对癌细胞周期的影响;(3)分析PAMAM-eIF4E-shRNA纳米微粒的治疗机理。研究意义:本研究设计和构建了一种新型的PAMAM-eIF4E-shRNA纳米微粒，用于治疗人肝癌细胞。与传统的化学药物相比，PAMAM-eIF4E-shRNA纳米微粒具有更强的特异性、更低的毒性，更高的生物利用度和生物安全性。因此，本研究对于研究治疗肝癌的新型方法和理论机制具有重要意义，对于开发新型药物，提高肝癌治疗效果也有重要的启示作用。参考文献：1.WangP,ZhangN,LiC,etal.ImprovedRNAiofeIF4Edeliveredbyaparamagneticcationicliposomeinhepatomatherapy.[J].InternationalJournalofNanomedicine,2015,10:2855.2.TanJ,QiG,YeY,etal.EnhancedAnti-TumorEfficacyofLiposome-EncapsulatedshRNATargetingEIF4ECoadministeredwithFolicAcidinHepatocellularCarcinoma.MolTherNucleicAcids,2020,23:20.3.ZhangZ,WuY,XieT,etal.DevelopmentandoptimizationofPAMAMdendrimer-basednanocarrierforefficientgenedeliveryinvitro.[J].JournalofBiomedicalResearch,2012,26(4):260-268.