产志贺毒素大肠杆菌Ⅰ型和Ⅱ型志贺毒素双抗体夹心ELISA检测方法的建立的任务书任务书题目：产志贺毒素大肠杆菌Ⅰ型和Ⅱ型志贺毒素双抗体夹心ELISA检测方法的建立任务目标本项目旨在建立一种新的ELISA实验方法，用于同时检测产志贺毒素大肠杆菌Ⅰ型和Ⅱ型志贺毒素。任务内容1.文献综述：综述当前关于产志贺毒素大肠杆菌和志贺毒素检测的研究情况。重点关注现有ELISA方法的优缺点，以及对于Ⅰ型和Ⅱ型志贺毒素同时检测的方法。2.建立ELISA检测方案：2.1.选择合适的抗体：根据文献综述，选择具有高度特异性和敏感性的抗体，用于夹心ELISA。对重要的生物标志物和反应性分子进行评估，以确定最佳抗体选择和使用。2.2.优化检测条件和反应体系：通过优化反应体系，以确定最佳检测条件，包括涂层抗体，检测抗体，稀释液，抗体浓度，反应时间等。2.3.确定检测限和特异性：通过检测一系列已知含量的标准参考样品（SRS）和不同类型的常见细菌，以确定检测限和特异性。3.验证ELISA方法：测试建立的ELISA方法在实际样品中的可靠性和重复性，验证其与现有方法的一致性，并进行相关数据的统计分析。4.实验结果分析：根据验证实验得到的数据进行分析，并对进一步实验提出建议。任务计划1.第一周：准备实验器材和材料，并进行文献综述，确定ELISA实验方法的建立流程。2.第二周：筛选合适的抗体，并确定检测条件和反应体系。3.第三周：使用标准参考样品和真实样品对ELISA方法进行优化和验证。4.第四周：进行相关数据的收集和分析，并撰写实验报告。任务资源实验器材和材料：冰箱、PCR机、SDS-PAGE凝胶电泳仪、色谱柱、ELISA微孔板、吸头、乙醇、紫外灯、洗涤缓冲液、检测抗体和标记抗体等。预期成果1.建立同时检测产志贺毒素大肠杆菌Ⅰ型和Ⅱ型志贺毒素的双抗体夹心ELISA方法。2.验证并评估建立的检测方法的可靠性和灵敏度。3.提供对于检测方法优化和改进的建议。参考文献1.Padhye,N.V.(2004).Detectionofstx1andstx2GenesinStoolSamplesfromAcuteGastroenteritisCasesbyPCR.BioMedresearchinternational,2004(3),177–181.2.MontenegroMA,etal.DevelopmentofamethodtodetectShigatoxin-producingEscherichiacoli(STEC)infreshvegetables.LettApplMicrobiol.2013Apr;56(4):247-53.3.Feng,P.,etal.(2012).Multiplexreal-timePCRassayfordetectionandgenotypingofShigatoxin-producingEscherichiacoliinhumanfecalsamples.Journalofclinicalmicrobiology,50(7),2460-2465.4.Sabino,R.,etal.(2016).AntibodydiversityintheEscherichiacoliOantigenfromShigatoxin-producingE.colistrainsisolatedinBrazil.Frontiersinmicrobiology,7,1557.5.Wlodarska,M.(2015).Controlofbacterialvirulencebyreactiveoxygenspecies.Trendsinmicrobiology,23(5),273-279.