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本章重点和难点:了解细菌进行遗传物质交流的方式,掌握细菌染色体作图的方法。细菌和病毒在遗传研究中的优越性第一节细菌的细胞和基因组细胞结构细胞膜拟核细胞质(核糖体)细胞壁(鞭毛伞毛荚膜芽胞)与真核细胞的差异缺乏线粒体、叶绿体,无核膜;染色体裸露的共价闭合环状双链DNA分子附加体小型环状DNA(质粒)游离或整合状态细菌遗传的实验研究方法(一)细胞计数(培养物细胞浓度)(二)建立纯系的方法——纯培养(三)选择培养法鉴定突变型与重组型(四)突变型与重组型的批量筛选方法影印培养法影印培养法接合转化1.接合现象的发现1946年J.Leaderberg和E.Tatum单基因突变率10–6原养型的出现以A、B菌株直接接触为前提2.F因子及其转移2.F因子及其转移2.F因子及其转移据F因子有无以及存在状态E.Coli有三种类型:F﹣不含有F因子F+×F﹣→Hfr×F﹣→有4个大肠杆菌菌株1、2、3和4的基因型均为a+b-,另外4个菌株5、6、7和8的基因型为a-b+,将两种不同基因型的菌株充分混合后进行平板培养,以确定a+b+重组子的频率。在以下结果中,M表示许多重组子,L表示少量重组子,O表示无重组子,请根据下述结果,指出每一菌株的性别类型(Hfr、F+还是F-)3.中断杂交试验及染色体作图步骤:LacgaltonaziHfrHfr有4个大肠杆菌的Hfr菌株按以下顺序转移其标记基因:菌株基因转移顺序MZXWCLANCWALBRUZMURB上述所有Hfr菌株都衍生于同一F+菌株,这些基因在原始菌株的环状染色体上排列顺序如何?据F因子有无以及存在状态E.Coli有三种类型:F﹣不含有F因子接合时:⑴Hfr菌株的基因是按一定的线性顺序依次进入F﹣菌株的。⑵基因位点离原点越近,进入F﹣越早,重组机会越多;反之越晚。⑶F因子插入的位置不同,使不同的Hfr菌株有自己稳定的转移起点和次序。从A到E为源于同一大肠杆菌F+菌株的5个Hfr株,括号内的数字示中断杂交试验的5个基因进入F-受体菌所需的时间:4.细菌重组与E.Coli染色体作图二.性导F′lacF′lactsx比较F′、F+和Hfr可知F′因子的特点:⑴是细胞质因子,可携带1至多个紧密连锁的基因。⑵高频率转移它的基因(如同F因子)。⑶有极高的自然整合率,且整合到细菌染色体一定的座位上。F′因子的主要用途F+×F﹣→三.转化转化的发现1928年,F.Griffith肺炎双球菌转化的条件:⑴感受态的受体细胞⑵转化因子DNA的大小、形态和浓度⑶受体和供体染色体的同源性转化过程F=×100%=58.8%供体菌株trp+his+tyr+受体菌株trp-his-tyr-四.转导2.普遍性转导(一般性转导)2.普遍性转导(一般性转导)两个基因距离越近,并发转导的可能性越大在大肠杆菌中,thr和leu两个基因在细菌基因组中相距约为2%,试问这两个基因能否用P1噬菌体进行并发转导?为什么?如果能,其频率如何?普遍性转导与作图在以P1噬菌体进行的普遍性转导系统中,供体菌株的基因型为pur+nad+pdx-,受体菌为pur-nad-pdx+。转导后,首先选择供体等位基因pur+,然后针对其他等位基因对其中50个pur+转导子进行筛选,结果如下大肠杆菌供体trpA+supC+pyrF+受体trpA-supC-pyrF-(1)supC+trpA+pyrF+36(2)supC+trpA+pyrF-114(3)supC+trpA-pyrF+0(4)supC+trpA-pyrF-453根据重组体频率推导基因顺序流产转导(abortivetransduction)转导DNA分子进入受体细胞后,不与受体基因组发生交换,不随细胞DNA复制而复制,而是很稳定地存在于细胞质中,形成流产转导。3.局限性转导(特殊性转导)本章要点:细菌利用几种机制,在DNA分子间和细胞间转移DNA序列。大肠杆菌中的F因子在接合中将染色体转移至另一细胞转化中,细菌细胞摄取周围介质中的DNA,并通过同源重组将其整合进自己的基因组,同时取代自己的一些基因。一些种类的噬菌体在转导中整合并转移细菌基因至新寄主细胞。细胞结构细胞膜拟核细胞质(核糖体)细胞壁(鞭毛伞毛荚膜芽胞)与真核细胞的差异缺乏线粒体、叶绿体,无核膜;染色体裸露的共价闭合环状双链DNA分子附加体小型环状DNA(质粒)游离或整合状态(二)建立纯系的方法——纯培养影印培养法步骤:4.细菌重组与E.Coli染色体作图F+×F﹣→