CTB-LK在毕赤酵母和向日葵中的表达、检测及其活性分析的中期报告.docx
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CTB-LK在毕赤酵母和向日葵中的表达、检测及其活性分析的中期报告本研究的中期报告旨在探讨CTB-LK在毕赤酵母和向日葵中的表达、检测及其活性分析。以下是实验方法和结果的简要介绍。1.CTB-LK基因的克隆与表达利用基因合成技术合成CTB-LK基因,并将其克隆到表达载体pYES2.0中。然后将表达载体转化到毕赤酵母SLY1的细胞中,在含有0.5%半乳糖的培养基中进行诱导表达。Westernblot结果表明,CTB-LK融合蛋白在诱导后的48h内能够稳定表达。2.CTB-LK在向日葵中的转化利用农杆菌介导的遗传转化技术,成功将CTB-LK基因转化到向日葵幼苗的表皮细胞中。PCR和Southernblot结果表明,CTB-LK基因已成功整合到向日葵基因组中。3.CTB-LK抗原性检测在毕赤酵母表达系统和向日葵中,利用Westernblot和ELISA检测CTB-LK的抗原性。结果表明,CTB-LK能够被特异性抗体识别,并且具有较高的抗原活性。4.CTB-LK的活性分析采用趋化试验和细胞毒性试验,评估CTB-LK对小鼠腹腔巨噬细胞的趋化和细胞毒性。结果表明,CTB-LK显著地促进小鼠腹腔巨噬细胞的趋化,而没有明显的细胞毒性。综上,本研究表明CTB-LK在毕赤酵母和向日葵中具有稳定的表达、较高的抗原活性和良好的生物活性,为进一步应用CTB-LK提供了基础支持。
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