荧光分光光法学习教案.ppt
上传人:王子****青蛙 上传时间:2024-09-13 格式:PPT 页数:21 大小:1.4MB 金币:10 举报 版权申诉
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会计学第一节概论(gàilùn)一、应用(yìngyòng):第二节基本原理最常见的光致发光:荧光和磷光。两者发光机理不同,寿命不同。荧光寿命10-9~10-6秒,磷光寿命10-3~10秒。荧光可由激发态的分子产生,也可由激发态的原子产生,本章介绍分子荧光。由于荧光的产生由价电子引起,所以,荧光光谱属于电子光谱,其波长范围(fànwéi)位于:紫外光区和可见光区。二、激发光谱和发射光谱(fāshèꞬuānꞬpǔ)⒉发射光谱(fāshèɡuānɡpǔ)固定激发光波长,以荧光波长对荧光强度F所作的光谱曲线。三、分子(fēnzǐ)荧光与分子(fēnzǐ)结构的关系四、荧光(yíngguāng)强度与浓度的关系第三节荧光(yíngguāng)分光光度计二、主要部件(bùjiàn)及功能3.样品池须用石英(shíyīng)材料制成。4.荧光单色器将样品池中的散射光、反射光、杂质荧光等滤掉,只让荧光通过。出射狭缝宽度可调。5.检测器光电转换元件,测定荧光的强度。检测方向与激发光方向垂直:在垂直方向上没有透过光的干扰。由于荧光的强度较弱,一般以光电倍增管作检测器。第四节定量分析(dìngliàngfēnxī)⑴配制一系列待测成分的标准溶液C1C2C3C4C5⑵测出相应的荧光强度(qiángdù)F1F2F3F4F5⑶建立工作直线(F→C)①作图法②回归法⑷测量待测样品,得F样①从工作直线上找到待测成分的浓度C样②由回归方程计算出C样二、影响荧光强度测定(cèdìng)的因素4.溶剂(róngjì)有些溶剂(róngjì)会使荧光效率下降,也可能带来干扰荧光。灵敏度高。可高达ppb级(10-9),甚至(shènzhì)ppt级(10-12)。选择性好,与能产生荧光的物质少有关。思考题二、问答题试述分子荧光产生的过程。试述分子荧光强度(qiángdù)与浓度的关系式,并说明公式成立的前提条件及原因。分别说明荧光分光光度计两个单色器的作用,以及将光路设计成直角方向的原因。为什么可见光分光光度计的光路是直线方向,而荧光分光光度计的光路是直角方向?荧光分析的激发光谱和发射光谱分别提供了哪些定量分析信息(xìnxī)?核黄素的激发光谱(实线)和发射光谱(虚线)如图所示,对核黄素进行荧光定量分析时,最佳的激发光波长和荧光波长各为多少?为什么?内容(nèiróng)总结