临床常见标本的微生物检验.ppt
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主要内容一、血、骨髓、静脉导管标本(一)血培养检测采血指征临床上疑为败血症、脓毒血症或其他血液感染的患者1.发热(≥38℃)或低温(≤36℃)2.寒战3.白细胞增多(>10×109/L,特别有“核左移”未成熟的或杆状核白细胞增多)4.粒细胞减少(成熟的多核白细胞<1×109/L)5.血小板减少6.皮肤粘膜出血7.昏迷,休克、多器官衰竭8CRP升高在评估可疑新生儿败血症时,除发热或低烧外,很少培养出细菌,应该补充尿液和脑脊液培养。对入院危重感染患者未进行系统性抗菌药物治疗之前,应及时采集血培养。骨髓炎或长期使用抗菌药物者骨髓培养阳性率高于血培养。(二)血培养检测消毒程序1.皮肤消毒程序:严格执行三步法(防止皮肤寄生菌污染)(1)用75%酒精擦拭静脉穿刺部位待30s以上;(2)然后用1%-2%碘酊作用30秒或10%碘伏作用60秒,从穿刺点向外画圈消毒,至消毒区域直径达3cm以上;(3)最后用75%酒精脱碘,待酒精挥发干燥后采血。新生儿及对碘过敏的患者,只能用75%酒精消毒60s,待穿刺部位酒精挥发干燥后穿刺采血。2.培养瓶消毒程序:(1)用75%酒精消毒血培养瓶橡皮塞,作用60秒。(2)用无菌纱布或无菌棉签清除橡皮塞表面剩余的酒精,然后注入血液。。无论采用何种采血方法,血培养可接受的污染率通常是≤3%。1.严格无菌操作,避免被体表或腔道正常菌群污染;2.不要和血气、血沉的取血同时进行;3.穿刺点消毒不使用低效消毒剂,切勿在静滴的静脉处取血;4.不宜从静脉导管或静脉留置口取血,若从该部位取血,应在申请单上注明;最好同时静脉取血,以求进行比对;5.不推荐静脉血直接入瓶,以免血量控制不好或对患者不利;6.不主张换针头入瓶,以免增加污染的机会。7.采血前把血培养瓶从冰箱拿出后,待恢复至室温后采集,采集后切勿放回冰箱。(三)血培养标本采集和运送1.采集时间患者出现寒战、体温升高前;使用抗菌药物前;患者已使用抗菌药物的情况下,若出现明显的发热前期症状,可在寒战前或寒战后1h内采血;若无明显的寒战阶段,应在第二次服抗菌药物前采血;对于无明显感染病灶或未找到发热原因的发热患者,先在不同部位采集2-3份血标本,间隔大于或等于1h,24h-36h后再次采集2份以上;疑似沙门菌感染的患者在病程第1-2周采集静脉血;建议:同时采集2-3瓶(不同部位);需氧菌、厌氧菌各一份,采集后同时送检;在采血后的2-5天无需重复采血培养;2.采集部位要求:从两侧上肢静脉采血,“双瓶双侧”采血培养。至少做到“双侧双瓶”。必要时从下肢静脉采血做第三套血培养。不建议采集(1)动脉血,因其诊断价值没有比静脉血更大;(2)静脉留置导管,因其常伴有高污染率。所谓“双瓶双侧”,是指从一个部位采血接种一套培养瓶,再从另一部位采血接种另一套培养瓶。(通常是双臂)所谓“双侧双瓶”,是指从一个部位采血接种一个需氧瓶,再从另一部位采血接种另一个厌氧瓶。一次静脉采血注入到多个培养瓶中应视为单个血培养。3.采集次数要求:对怀疑菌血症、真菌血症的成人患者,推荐同时采集2~3套(不同部位)血培养标本。(即双瓶双臂同时采集血培养标本。)婴幼儿患者,推荐同时采集2次(不同部位)血培养标本。为什么要求多次采血?4.采血量要求:成年患者推荐的采血量为每套不少于10ml,每瓶不少于5ml。婴幼儿患者推荐的采血量为每瓶不少于2ml。说明:血标本采集的量是影响检出率的最重要的因素。成人血培养采血量在2~30ml之间,病原菌检出率与采血量成正比例增长。每增加1ml的血液,病原菌的检出率增加3.2%。儿童患者因为血液中病原菌浓度较高,血培养量无需等同于成人。对血液病患者或者血容量相对较低的患者建议使用儿童瓶来减少血液的采集量增加病原菌的检出率。5.血培养标本的运送要求:(1)采集后的血培养瓶应在1小时之内送往实验室。(2)血培养瓶在接种前和接种后均不得冷藏和冷冻。血液标本的处理双相培养瓶二.导管相关性血流感染的标本培养Maki滚动法二、痰及下呼吸道标本咳痰途经口咽部不可避免地受到污染唾液中口咽部定植菌的浓度可达108~109/ml。研究显示,国内常规痰标本中约半数存在唾液严重污染现象。(一)采集指征凡是发热、咳嗽和咳痰,痰呈脓性、粘稠或血性,并伴有胸痛、气急,肺部闻及湿罗音,外周白细胞总数及中性粒细胞比例明显增高,X线检查提示肺部有炎性浸润或胸腔积液,甚至出现感染性休克和呼吸衰竭等患者,应采集痰液或下呼吸道标本。对可疑烈性呼吸道传染病(如SARS、肺炭疽、肺鼠疫等)患者采集检验标本时必须注意生物安全防护。(二)采集时间在抗生素应用前采集痰标本;标本采集后1~2h内必须立即进